Sintesis de lipidos
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EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DE LIPIDOS POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
Barceló Bovea V.; Díaz Duran K.; Utria Martínez M.
Universidad Del Atlántico, Facultad De Ciencias Básicas, Química
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RESUMEN-------------------------------------------------
Se trabajaron con 4 sustancias: aceite de bacalao, aceite esencial, aceite vegetal, manteca y huevo, a las cuales se les realizo la extracción de lípidos totales, con el fin de ser analizadas cualitativamente mediante pruebas colorimétricas como la reacción de Liebermann Burchard para la determinación de esteroles, la prueba de Furter Meyer modificada para la determinación detocoferoles y la reacción de Carr-Price para determinación de Vitamina A. por último se realizo a cada una de las muestras separación por cromatografía en capa fina.
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INTRODUCCIÓN
Los lípidos son un grupo heterogéneo de compuestos emparentados, real o parcialmente, con los ácidos grasos. Tienen la propiedad común de ser:1) relativamenteinsolubles en agua y 2) solubles en los solventes nos polares como el éter, el cloroformo y el benceno. Así los lípidos incluyen a grasas, aceites, ceras y compuestos relacionados.
Los lípidos se clasifican en dos tipos generales: aquellos que son semejantes a las grasas y ceras, los cuales contienen enlaces ester y pueden hidrolizarse, y aquellos semejantes al colesterol y otros esteroides, los cualesno tienen enlaces ester y no pueden hidrolizarse. (2)
Los lípidos pueden encontrarse unidos covalentemente con otras biomoléculas como en el caso de los glicolípidos (presentes en las membranas biológicas). También son numerosas las asociaciones no covalentes de los lípidos con otras biomoléculas, como en el caso de las lipoproteínas y de las estructuras de membrana.
Reacción deLiebermann-Burchard: La demostración de la presencia del colesterol se hace por medio de la reacción Liebermann-Burchard, que es específica para esteroles con instauraciones en los anillos A, B o C. (3)
Las técnicas cromatográficas se emplean para separar los componentes individuales de una mezcla y, en ciertos casos, para identificar un compuesto comparando su comportamiento cromatográfico con el de sustanciasconocidas empleadas como patrón.
La base de la técnica es que cuando un determinado soluto interactúa con dos fases, una de ellas, habitualmente sólida, llamada fase estacionaria, experimenta una serie de procesos (adsorción en fase sólida, solubilización en cada fase, arrastre por la fase móvil, etc.) que, en último extremo, llevan a que el soluto se reparta entre ambas fases. En el equilibrio,la relación entre las concentraciones del soluto entre ambas fases es constante, y se denomina coeficiente de reparto. Si en una mezcla, cada componente tiene un coeficiente de reparto diferente del de los otros, la separación será buena. Naturalmente, dicho coeficiente depende de la naturaleza de las fases, así como de las condiciones de la cromatografía. (4)
Con el fin de; Estudiar loslípidos; su importancia, clasificación, función y características físico-químicas. Estudiar la importancia de las diferentes pruebas usadas en la identificación de los lípidos, para ello aisló el colesterol de la yema del huevo y otros aceites de origen vegetal mediante reacción de Libermann Burchard.
Procedimiento
Primera Parte: Extracción de lípidos totales.
A 1 mL de cada muestra se leagregaron 4 mL de una mezcla de metanol-cloroformo 2:1, se agito vigorosamente durante 5 minutos y se Calentaron en un baño termostatizado a 50ºC durante 30 min. Se dejaron reposar por 10 minutos sobre la gradilla. Posteriormente se agrego 1,5 mL de cloroformo y 1,5 mL de agua destilada a cada una de las muestras, se mezclaron nuevamente durante 5 minutos, y centrifugue por 5 minutos a 10.000 rpm....
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