Técnica De Separación Por Cromatografía De Papel

Química Biológica I TP 9 CROMATOGRAFIA de Partición OBJETIVO: -Separar mediante cromatografía de partición en papel los hidratos de carbono presentes en una muestra. -Separar mediante cromatografíade partición en papel los aminoácidos de una muestra dada.

FUNDAMENTO La cromatografía en papel se utiliza para compuestos muy polares o polifuncionales. El uso más común es para azúcares,aminoácidos y pigmentos naturales. En esta cromatografía se utiliza el fenómeno de partición en donde la fase estacionaria se halla sobre un soporte activo (el papel) que en realidad forma parte de la faseestacionaria que es el agua. Las fases móvil y estacionaria estarán en contacto en una gran interfase, lo que permite una rápida obtención de una distribución de equilibrio del soluto entre ellas. Si lamuestra problema está formada por más de un soluto, éstos se separan por sus diferentes coeficientes de partición. La realización de la cromatografía en papel implica la siembra de la muestra problemaen un trozo de papel de buena calidad, en general Whatman N°1 para cromatografía analítica, que luego se introducirá en una cuba de desarrollo de modo que el solvente ( fase móvil) ascienda porcapilaridad (técnica ascendente) o descienda por capilaridad y gravedad (técnica descendente). La fase estacionaria es un complejo celulosa - agua que tiene un poder diferente que el del agua pura.ETAPAS DE LA CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

Siembra: Se aplican muestras en solución a no menos de 1,5 cm del borde inferior de una tira rectangular de papel, y a no menos de 1,5 cm de los bordes laterales,manteniendo a su vez, entre mancha y mancha una distancia no menor de 1 cm. Se hace un toque, se evapora el solvente, se hace otro toque, tratando de concentrar la muestra sin superar un diámetro de lamancha de 3 mm. La siembra es puntual para fines analíticos, y en banda para fines preparativos.

Desarrollo: Ascendente: el solvente se coloca en el fondo de la cuba y el papel se suspende...