T cnicas empleadas en el estudio de las c lulas MI EXPOSICION
el estudio de las
células.
Hurtado Lopez Rosa Beatriz
Miriam Ávila Ceja
Melanie Hernández
Alejandro Miguel Peralta Sandoval
Brenda Ramírez Valdovinos
Cuando hablamos de técnicas de estudio de
las células estamos hablando de la citología.
I) Técnicas para el estudio bioquímico: sirven para conocer
la composición y relacionar esta composición con las
estructuras celulares.Estos métodos son:
a) Fraccionamiento celular
b) Cromatografía
c) Electroforesis
d) Cultivos "in vitro“
II) Técnicas para el estudio morfológico: nos permiten
conocer cómo es su forma, su tamaño y su estructura. Son,
fundamentalmente:
a) Microscopía óptica
b) Microscopía electrónica
I) Técnicas para el estudio bioquímico de la
célula
A)FRACCIONAMIENTO CELULAR: Consiste en la separación de loscomponentes de una mezcla en función de las diferencias entre las
velocidades que presentan al someterlos a elevadas aceleraciones. Se
lleva a cabo en dos pasos:
1) FRACCIONAMIENTO: El material biológico, es triturado para
disgregarlo y romper las membranas celulares. La rotura de las
membranas deja en libertad los orgánulos celulares y el contenido del
hialoplasma. Obtendremos así una "papilla" queestará compuesta de
restos de membranas, orgánulos celulares, núcleos, moléculas libres y
agua.
2) CENTRIFUGACIÓN: Se separan los diferentes compuestos del
homogeneizado en función de su densidad, mediante un instrumento
llamado ultracentrífuga. Primero se somete a una centrifugación de baja
velocidad separándose los organelos mas densos en el precipitado y los
menos densos en el sobrenadante,este se decanta para ser sometido de
nuevo a una centrifugación de mayor velocidad y si sucesivamente se
obtienen una serie de fracciones en los diversos precipitados que
contiene los distintos orgánulos celulares.
B) CROMATOGRAFIA
Se fundamenta en la separación de los componentes de una mezcla
por sus diferencias de absorción. Estas diferencias van a ser debidas
a las fuerzas Van der Waals que seestablecen entre los componentes
de la mezcla y una sustancia que actúa de fase estacionaria. Según
la naturaleza de la fase estacionaria, tendremos dos tipos de
cromatografía:
-Sobre papel:
-De gases:
Cromatografía sobre papel
Se emplea para la separación de sustancias químicas
que presentan propiedades muy parecidas. Se opera
de la siguiente manera: una pequeña cantidad de la
mezcla a separarse deposita sobre un fragmento de
papel poroso, a continuación se introduce el borde del
papel a una sustancia que sea soluble para los
componentes. El disolvente se desplazara por
capilaridad y los ira arrastrando. Para observar los
componentes ya separados se emplean reacciones
coloreadas específicas.
Cromatografía de gases
El aparato consiste en un serpentín largo y delgado
cuyas paredesestán impregnadas por un liquido (fase
estacionaria). La mezcla a separar se vaporiza y
atraviesa el serpentín transportada por un gas. La fase
estacionaria retiene mas o menos los diferentes
componentes de la mezcla. Estos se detectan cuando
al atravesar una llama entran en combustión, lo que
aumenta la conductividad eléctrica del detector. Este
método tiene la ventaja de necesitar pequeñísimascantidades y es capaz de separar sustancias muy
parecidas químicamente; por ejemplo: ácidos grasos,
azucares u hormonas.
C) ELECTROFORESIS
En este método, la mezcla a separar se
deposita en una cubeta sobre un soporte de tipo
poroso (acetato de celulosa o también gel de
Almidón). A continuación se establece una
diferencia de potencial entre los extremos del
soporte. Las sustancias que componen lamezcla
Se desplazaran en función de su carga eléctrica.
Naturalmente este método se empleara con
Sustancias que presenten cargas eléctricas
(Proteínas y ácidos nucleicos)
D) CULTIVOS IN VITRO
Estos métodos nos van a permitir mantener
líneas celulares en el exterior de un organismo en
condiciones favorables a su multiplicación.
Las células extraídas deben mantenerse para
su cultivo en un medio...
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