03 Gen Tica Microbiana 2

Uso de plásmidos y fagos como vectores de
clonación
Definiciones
• La modificación deliberada del genoma de un microorganismo a
través del cambio de la secuencia de nucleótidos que lo conforman
sedenomina como ingeniería genética y se logra a través de la
aplicación de una serie de métodos conocidos como tecnología
del ADN recombinante.
• Biotecnología: una serie de procesos por los cuales unorganismo
es manipulado, particularmente a nivel genético para la obtención
de productos de interés.
• La microbiología industrial usa microorganismos para producir
una gran diversidad decompuestos/productos de origen
microbiano y no microbiano

Ingeniería genética
Herramientas moleculares:

Llamada también
metodología del DNA
recombinante: conjunto de
herramientas y métodos que
permiten lamanipulación in
vitro —la edición
molecular— del material
genético de los organismos
vivos.

•

Enzimas: que modifican el DNA: de restricción,
ligasas, fosfatasas, nucleasas, etc.

•

Vehículosmoleculares de clonación de DNA:
moléculas de DNA que permiten la replicación
de fragmentos de ácido nucleico incapaces de
hacerlo en forma autónoma.

•

Cepas hospederas poeradoras del vehículo de
clonación.Fábrica biológica (microbial cell
factories).

•

Otras tecnologías de manipaulación de DNA:
PCR

•

Tecnologías –omicas: genómica, transcriptómica

Uso de la tecnología de DNA recombinanteVectores de clonación: plásmidos
Capacidad de carga (DNA a insertar): hasta 10 kb.
Gran diversidad comercial: bajo, mediano y alto
número de copias

Vectores de clonación: cósmidos/fósmidos
• Cósmidos(COS): sitios cos del fago
lambda para empacamiento in vitro +
plásmido
• Fósmidos (FOS): similares al los
cósmidos pero se basan el plásmido Fde E. coli
Capacidad de carga: hasta 40 kbhttp://www.epibio.com

Vectores de clonación: BAC
BAC (bacterial artificial
chromosome): vectores derivados
del plásmido F de E. coli
Capacidad de carga hasta 200 kb

• Producción de enzimas de origen vegetal...