2015 1 Cromatografia 1

UNIVERSIDAD DEL PACIFICO
Departamento de Ciencias Naturales y Exactas DECINE
Área Biología - Química
LABORATORIO DE QUÍMICA

CROMATOGRAFÍA
1.

¿ REACTIVOS Y MUESTRAS

REACTIVOS Y MUESTRAS
REACTIVOAgua Destilada
Cristal violeta
Cloroformo
Diclorometano

REACTIVO
Etanol
Anaranjado de metilo
Verde de bromocresol
Rojo Congo

REACTIVO
Acetato de etilo
Metanol
Acetona
Éter

PROCEDIMIENTOPROCEDIMIENTO

1.

PREPARACIÓN DE LA PLACA CROMATOGRAFÍA (CROMATOPLACA)
A.
B.
C.

Marque suavemente sobre la placa una línea recta (por el lado inferior más corto)
Introduzca un tubo capilar en la disolución 1,tome una pequeña cantidad de la misma y póngala
cuidadosamente sobre la línea trazada en la placa cromatográfica (a unos 2 mm el borde izquierdo)
Repita e procedimiento anterior con la disolución 2aplicando al muestra a unos 3 mm de la muestra anterior
y así sucesivamente con las disoluciones que el instructor indique.

Ilustración 1: Aplicación de la muestra

1
Cromatografía en Capa Fina (CCF)LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

2.

DESARROLLO DEL CROMATOGRAMA
A.

B.

C.

Las aplicaciones (manchas) se dejan secar y se introducen en el
interior de una cubeta de cromatografía (puede ser un vaso deprecipitados de 200 ml) conteniendo de 3 a 5 mL del disolvente a
probar, de modo que el disolvente no toque la zona en la que se
encuentran las aplicaciones.
Se tapa la cubeta y cuando el disolvente haascendido a alcanzar 5 mm
del borde superior se saca la placa y se marca, con lápiz, el nivel del
disolvente en un extremo de la misma.
(Es importante que mientras dure la elución, el sistemapermanezca
sin perturbaciones)
Se deja secar y se miden las distancias recorridas por el frente del
disolvente y para cada aplicación para calcular el valor de Rf
Ilustración 2: Desarrollo de la placa

Lossolventes a ensayar son: cloroformo, acetato de etilo, etanol, agua, metanol, acetona, éter

Ilustración 3: Calculo del Rf

PARA EL INFORME DE LABORATORIO

PARA EL INFORME DE LABORATORIO
1.

Para la...