Absorcion Intestinal De Aminoacidos

Universidad de San Carlos de Guatemala

HIDRÓLISIS DEL ALMIDON POR AMILASA

Introducción
Las enzimas que se encargan de hidrolizar el almidón se les conoce con el nombre de amilasas y son de origen animal o vegetal. Esta enzima actúa sobre el polímero rompiendo los enlaces alfa-1,4 que existen en el almidón. Si la amilasa empieza a romper la cadena desde la parte externa se le denominaexoamilasa y si empieza a romper la cadena desde la parte central se le denomina endoamilasa.
No solo la amilasa es la enzima que puede degradar al almidón sino que hay otras como: glucan agua dicinasa, fosfoglucan agua dicinasa, alfa y beta amilasa, enzimas desramificadoras, etc.

Metodología
Para llevar a cabo el procedimiento se mezcló el almidón con la amilasa sometiéndolo a baño maría yposterior a ello se tomaron alícuotas a diferentes tiempos, éstos también fueron sometidos a baño maría y se les agregó los respectivos reactivos. También se elaboró una curva de calibración con glucosa y agua destilada y al final se hizo una lectura en el espectrofotómetro a 630nm. Toda la práctica tiene como objetivo conocer el efecto de la amilasa sobre el almidón, determinar la cantidad de azúcaresreductores liberados y desarrollar la metodología para la determinación de azúcares reductores.

Resultados
|Tabla No. 1: Datos para Curva de Calibración |
|Muestra |[Glucosa] (M) |Abs |
|Blanco |0 |0 |
|1 |1.39*10´`-7 |0.230 |
|2|2.78*10´`-7 |0.237 |
|3 |4.16*10´`-7 |0.243 |
|4 |5.55*10´`-7 |0.339 |
|Fuente: Datos Experimentales |

|Tabla No. 2: Moles de enlaces alfa(1-4) rotos por la alfa-amilasa |
|Tiempo (min) |Absorbancia a 630 |Sitios reductores |Sitiosreductores |
| |nm |detectados (concentración |liberados en el período M|
| | |de glucosa) M | |
|0 |0.062 |4.17*10´`-8 |4.17*10´`-8 |
|5 |0.099 |1.10*10´`-7 |6.86*10´`-8 |
|10|0.118 |1.46*10´`-7 |3.52*10´`-8 |
|15 |0.193 |2.85*10´`-7 |1.39*10´`-7 |
|20 |0.24 |3.72*10´`-7 |8.72*10´`-8 |
|Fuente: Datos Experimentales |

Gráfica No. 1 Curva deCalibración
[pic]
Fuente: Datos Experimentales
Gráfica No. 2 Concentración de Glucosa con relación al tiempo

Fuente: Datos Experimentales

Discusión de Resultados

El efecto de la amilasa sobre el almidón, es hidrolizar los enlaces α(1-4) de tal forma que la aplicación de calentamiento provoca la ruptura de la enzima (amilasa) del almidón; laaplicación de los reactivos de Somogy y Nelson, permiten determinar la cantidad de sitios reductores detectado y liberados [1].
La hidrólisis del almidón por amilasa se realizó a través de los reactivos de Somogy y Nelson, el papel fundamental de éstos reactivos es: el reactivo de Somogyi al actuar con la glucosa (azúcar reductor), calentada en una solución alcalina de cobre cúprico, el cobre esreducido y precipitado como óxido cuproso. El óxido cuproso formado es proporcional a la cantidad de azúcar reducida presente. El cobre reducido es determinado por la medición de la cantidad de molibdeno azul formado cuando se adiciona el reactivo de arsenomolibdato [2].
El reactivo arsenomolibdato desarrolla un color en donde la intensidad es proporcional a la cantidad de óxido cuproso...