actualizacion en estudios microbiologicos

Universidad de Los Andes
Facultad de Medicina
Escuela de Medicina
Extensión Valera

Actualización en Estudios
Microbiológicos
Libia Vásquez Paredes
Medico Microbiólogo

TECNICAS
MOLECULARES
• En1970 se describe las técnicas de Hibridación
• En 1980 se describe la amplificación de ácidos
nucleicos con enzimas termoestables o
polimerasas conocida como PCR
• Secuenciación de sondas de ADN
•Electroforesis en gel de campo pulsátil
• PCR en tiempo real

Las Técnicas Moleculares
son:
• Métodos Directos y
nos indican
• La Presencia o
Ausencia
• Material Genético del
Patógeno

METODOS DEHIBRIDACION DE LOS ACIDOS
NUCLEICOS
Se basan en la capacidad de dos cadena de acido
nucleico con secuencias de bases complementaria
para unirse entre si y formar una molécula de cadena
doble o hibrido
•Requiere de una cadena de AN o sonda
proveniente de un microorganismo ya identificado
y la otra cadena o blanco a detectar.
• Se iniciaron en 1970 y los estudios moleculares
actuales tienen los mismosprincipios

METODOS DE HIBRIDACION DE LOS ACIDOS
NUCLEICOS
• Permiten la detección directa de microorganismos
a partir de muestras biológicas o de cultivos
• La hibridación positiva identifica almicroorganismo
desconocido como idéntico a aquel del que
proviene la sonda y en la hibridación negativa no se
detecta o no se identifica

REACCION EN CADENA DE LA
POLIMERASA
• En 1980 Kary Mulli describela técnica de Amplificación de
ácidos nucleicos empleando enzimas termoestables
(polimerasas)
• En 1983 premio Nobel en medicina
• Se basa en la amplificación in vitro de una secuencia única de
ADN enmas de un millón de veces
• Puede realizarse a partir de cualquier preparado biológico
• Tiene múltiples aplicaciones… infecciones, genética….

PCR
• Para esta técnica se requiere
La muestrabiológica ADN
Primers o secuencias iniciadoras
Nucleótidos conocidos como dNTPs o bases nitrogenadas
Enzima Taq ADN polimerasa
• Se da en 3 pasos
Paso 1 Desnaturalización temperatura de 95 grados… se...