Aislamiento E Identifcacion De Escherichia Coli En Alimentos

AISLAMIENTO E IDENTIFCACION DE Escherichia coli EN ALIMENTOS

Resumen
La Escherichia coli, también llamada E. coli ha sido una de las bacterias mas estudiadas por el ser humano ya que ella ha sido causante de diferentes enfermedades digestivas. En la práctica del laboratorio se realizo el aislamiento de la bacteria por medio de un caldo de cultivo y cultivándolo en 2 diferentes mediosselectivos (agar endo y agar McConkey), utilizando la lechuga como fuente de alimento para aislar dicha bacteria, posteriormente se dejo incuba a 42°C, durante un periodo de 24 a 48 días, obteniendo como resultado, ninguna colonia de Escherichia coli.
Abstract
Escherichia coli, also called E. coli has been one of the most studied bacteria by humans since it has been causing various digestivediseases. In the practice of laboratory isolating was performed from the bacteria by means of a broth cultures and growing in two different selective media (endo agar and McConkey agar), using lettuce as a food source for isolating said bacteria, and the allowed to incubate 42°C for a period of 24 to 48 days, obtaining as a result, no colonies of Escherichia coli.-------------------------------------------------

Objetivo general
* Aislar e identificar colonias de Escherichia coli.
Objeticos específicos
* Aprender e identificar Escherichia coli en agar endo y agar McConkey.
* Identificar la morfología macroscoipcamente y microscópicamente de Escherichia coli.
Materiales y Métodos:
* Agar Mc conkey (2 cajas)
* Agar Endo (1 caja)
* 90ml de solución salina(SSE)
* 4 tubos con 9 ml de SSE
* 4 pipetas estériles
* Pipeteado

1. adicionar al frasco que contiene 90ml de calco de cultivo 10mg de la muestra de alimentos (se debe pesar y adicionar cerca al mechero en condiciones de esterilidad) ésta se considera la dilución 10-1

Imagen N°1: Adición de la lechuga al caldo de cultivo, FUENTE: Propia

2. a partir de la dilución10-1 tomar 1 ml de muestra y adicionar al tubo rotulado como 10-2 (contiene 9ml de SSE). Realizar diluciones seriadas hasta 10-4




Imagen N°2: Muestras del caldo de cultivo del 10-1 hasta el 10-4, FUENTE: Propia

3. Sembrar 0,1ml de las diluciones 10-2 hasta 10-4 en las cajas de Petri con agar Mc conkey y agar endo ( con pipetas separadas que correspondan a la dilución)
4.Incubar de 24 a 48 horas a 42ºC.
5. Identificar colonias características de E.coli de acuerdo a las especificaciones del medio de cultivo.
6. Tomar las colonias sospechosas de presencia de E.coli para el montaje del Kit Bioquímico; e incubar.
7. Lectura e identificación bioquímica.

Resultados
* La Eschericha coli crece en condiciones ambientales, es anaerobio facultativoque crece con un p H optimo entre (6 y 7), a temperaturas de 37°C por lo que es mesofilo. El agar utilizdos para aislar E.coli es agar selectivos para bacterias gran negativas como lo son el agar Mc Conkey y el agar endo.
* Escherichi coli crecimiento en lechuga: Se relizo un experimentos, se expusieron las hojas de la lechuga a la E. coli y descubrieron que, después de 24 horas, laspoblaciones del microbio fueron 10 veces más grandes en las hojas jóvenes que en las hojas más maduras.
La explicación es porque las hojas jóvenes ofrecen más beneficios nutricionales para E. coli. Las hojas jóvenes tienen aproximadamente tres veces más nitrógeno y aproximadamente 1,5 veces más carbono que las hojas más maduras. También se mostro que E. coli no sólo se agarra a las hojas, sinotambién se multiplica.
* Al haber dejado en incubación las cajas de petri con la siembra en el agar Mc Conkey y agar endo, al pasar los 8 días de incubación se observo que ningún microorganismo creció ni se desarrollo en el medio de cultivo.

Imagen N°3: Muestras del caldo de cultivo del 10-1 hasta el 10-4, FUENTE: Propia

Discusión de resultados
* E.coli común mente se encuentra en...