aislar y purificar proteina
Páginas: 3 (748 palabras)
Publicado: 16 de marzo de 2013
PROTEÍNAS, -LACTALBUMINA
OBJETIVO GENERAL: Aislar y Purificar una proteína de la leche
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Aislar y purificar la proteína -lactalbumina de la leche.
2. Determinarla concentración de la proteína -lactalbumina de la leche
FUNDAMENTOS:
Las hembras de los mamíferos poseen glándulas mamarias las cuales secreten una sustancia nutritiva llamada Leche quetiene como función alimentar a sus recién nacidos. Está compuesta por variadas moléculas, tales como: hidratos de carbono, lípidos y proteínas, destacando dentro de esta última la α -lactalbumina,proteína que contiene una cadena polipeptídica de 123 aminoácidos, la cual posee dos dominios: uno largo de α -hélice y uno corto principalmente de lámina β.
Como la leche será nuestra fuente de la α-lactalbumina, debemos remover todas las otras proteínas y moléculas para así poder purificar y cuantificar la proteína en cuestión. Es de gran importancia aclara que el práctico se debe realizar con lechedescremada, ya que las grasas, al igual que las demás proteínas, interfieren en el análisis.
Las proteínas más abundan en la leche son la Caseína y las del lactosuero. Estas pueden ser separadas porprecipitación. Las proteínas del lactosuero, donde se encuentra la α- lactalbumina, pueden extraerse descartando la caseína, desnaturalización de esta que ocurre a los 40°. Esto provoca una disminuciónde la solubilidad, la que en asociación al uso de sales deshidratantes, provoca la precipitación de la Caseína, y posterior aislación de α- lactalbumina.
La cuantificación de α- lactalbumina sepuede hacer mediante el método de Bradford, que se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue G-250 (también Serva Blue) a las proteínas. El colorante, en solución ácida, existe en dos formas: unaazul y otra naranja. Las proteínas se unen a la forma azul para formar un complejo proteína-colorante con un coeficiente de extinción mayor que el colorante libre.
MATERIALES
Leche...
OBJETIVO GENERAL: Aislar y Purificar una proteína de la leche
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Aislar y purificar la proteína -lactalbumina de la leche.
2. Determinarla concentración de la proteína -lactalbumina de la leche
FUNDAMENTOS:
Las hembras de los mamíferos poseen glándulas mamarias las cuales secreten una sustancia nutritiva llamada Leche quetiene como función alimentar a sus recién nacidos. Está compuesta por variadas moléculas, tales como: hidratos de carbono, lípidos y proteínas, destacando dentro de esta última la α -lactalbumina,proteína que contiene una cadena polipeptídica de 123 aminoácidos, la cual posee dos dominios: uno largo de α -hélice y uno corto principalmente de lámina β.
Como la leche será nuestra fuente de la α-lactalbumina, debemos remover todas las otras proteínas y moléculas para así poder purificar y cuantificar la proteína en cuestión. Es de gran importancia aclara que el práctico se debe realizar con lechedescremada, ya que las grasas, al igual que las demás proteínas, interfieren en el análisis.
Las proteínas más abundan en la leche son la Caseína y las del lactosuero. Estas pueden ser separadas porprecipitación. Las proteínas del lactosuero, donde se encuentra la α- lactalbumina, pueden extraerse descartando la caseína, desnaturalización de esta que ocurre a los 40°. Esto provoca una disminuciónde la solubilidad, la que en asociación al uso de sales deshidratantes, provoca la precipitación de la Caseína, y posterior aislación de α- lactalbumina.
La cuantificación de α- lactalbumina sepuede hacer mediante el método de Bradford, que se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue G-250 (también Serva Blue) a las proteínas. El colorante, en solución ácida, existe en dos formas: unaazul y otra naranja. Las proteínas se unen a la forma azul para formar un complejo proteína-colorante con un coeficiente de extinción mayor que el colorante libre.
MATERIALES
Leche...
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