Aminoacidos Bioquimica

BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
MARIA DE LOS ANGELES TORRES VIDAL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

EDUARDO BALTAZAR MASTRANZO SANCHEZ

DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA — ALIMENTOS

RICARDO ERICK ESTRELLA RAMIREZ

¿PODEMOS SEPARAR UNA MEZCLA DE AMINOÁCIDOS POR CROMATOGRAFÍA ASCENDENTE ?

PRINCIPIOS GENERALES

CONCLUSIÓN:

OBJETIVOS:

La cromatografía se engloba dentro de las llamadas técnicasde
separación y permite el análisis de mezclas complejas de compuestos. Son varias las modalidades usadas y se clasifican según la fase móvil (de gases, líquida) y por el tipo de soporte
(columna, capa fina, papel) usados.
La separación se lleva a cabo según la distinta interacción que
presenta cada uno de los componentes de una muestra respecto a dos fases: una estacionaria y otra móvil quefluye sobre
ella. Esta interacción puede ser de varios tipos que a su vez dan
lugar a distintas subclases de cromatografía: de absorción, de
reparto, de cambio iónico, de afinidad, etc.
En esta práctica, vamos a usar la más simple de ellas, la cromatografía ascendente sobre papel. La fase estacionaria es la celulosa del papel y la móvil una mezcla de disolventes orgánicos
y agua. La celulosa retieneuna cierta cantidad de agua entrelazada entre sus fibras y puede dar lugar a un mecanismo de reparto de los componentes de una muestra aplicados sobre ella
cuando se hace fluir un disolvente de polaridad distinta de la del
agua. Según la solubilidad que tengan los componentes de la
muestra respecto de las dos fases así será su movilidad.

Los objetivos de esta práctica fueron llevar a cabo laseparación de aminoácidos por medio de una cromatografía ascendente siendo así la fase móvil el eluyente que fue una
mezcla de solventes y la fase móvil, el aminoácido. Se coloca los aminoácidos puros y después una mezcla de los mismos para tener una referencia y comparar los resultados.

Una vez realizada la cromatografía, la posición de los
componentes se determina mediante una técnica quepermita
“visualizarlos”
. Es común revelar la cromatografía mediante reacciones que
originen productos coloreados, como la ninhidrina. La ninhidrina que reacciona con aminoácidos que tengan el grupo
amino libre, dando lugar a la formación de amoníaco y anhídrido carbónico, con reducción del reactivo (la ninhidrina) a hidrindantina. La hidrindantina reacciona a su vez con amoníaco y otra molécula deninhidrina para dar un compuesto
de adición doble que presenta una coloración azulpúrpura, con la excepción de la prolina que da una coloración
amarillenta, debido a que su grupo amino está sustituido.

MATERIAL

REACTIVOS

2 Tubos de ensaye

NaOH

1 Fco. de gerber

Acetato de plomo

1 pipeta 5 ml

Mezcla de disolventes

1 pinza para tubo de ensaye

Ninhidrina

1 vaso de precipitado

Aminoácidos ensolución

Frasco

Hidróxido de amonio

Parrilla

PRINCIPIOS

CONCEPTOS
AMINOACIDOS: Un aminoácido es una molécula orgánica con

Cromatografía:La cromatografía es uno
de los principales métodos para la separación de especies químicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La cromatografía es un método físico
de separación basado en la distribución
de los componentes de una mezcla entredos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra móvil.
La ninhidrina es un poderoso agente
reactivo común para observar bandas de
separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos dando una coloración que varía de azul a violeta intenso.

Lisina: es un aminoácido componente de las proteínassintetizadas
por los seres vivos. Es uno de los 10aminoácidos esenciales para los
seres humanos.

Prolina: La prolina está involucrada en la producción
del colágeno. Está también relacionada con la reparación y mantenimiento de losmúsculos y huesos.

Leucina: Es uno de los aminoácidos esenciales. Este aminoácido
reduce los niveles de azúcar en la sangre y ayuda a aumentar la
producción de la hormona del...