Amor

4. preparación de medios.

4.1 características de los medios de cultivo celular
Para cultivar células in vitro, el ambiente debe ser lo mas parecido al posible al esperado in vivo. Son factoresambientales importantes el substrato sobre el que se crecen las células, el medio que rodea las células y la temperatura.
La composición completa de un medio que permita el crecimiento en cultivo decélulas de mamífero puede parecer muy complejo y el numero de los distintos medios disponibles puede resultar intimidatorio pero, básicamente cualquier medio de cultivo esta constituido por un medionutriente minimo tamponado e isotónico que contiene sales inorgánicas, una fuente de energía y aminoácidos, además de varios suplementos. Para la mayoría de las líneas celulares los suplementos sonrelativamente pocos, el principal de los cuales es el suero o un sustituto del suero.
En este capitulo se indican normas básicas para elaborar un medio general minimo al que además se anaden otrossuplementos para adecuarlo al crecimiento de células. La selección y preparación del medio adecuado es un aspecto importante del cultivo celular. Los distintos tipos de medio se caracterizan por susdiferencias en los componentes básicos, como los aminoácidos y las sales, y en su concentración.

4.1.1 tipos de medios y suplementos
Para la mayor partes de los objetivos de un cultivo celular resultaperfectamente adecuado un medio de tipo general. El medio basal de Eagle (BME) es uno de los medios definidos originales. Se utiliza normalmente para células adherentes (formadoras de tapiz o monocapa)como las células HeLa y algunas células primarias. Posteriormente se han desarrollado otros medio a partir del BME, como ejemplo, el medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM). Se elaboro añadiendoal medio CME una mayor cantidad de vitaminas y aminoácidos y se utilizo por primera vez para cultivar células de embrión de raton. Sin embargo, en la actualidad se emplea una amplia gama de líneas...