Analisis

Analisis Instrumental 2012
Guia de TP: Biologia Molecular
OBJETIVO: Comprender los fundamentos del la tecnica de PCR en sus versiones
gclasicah y gen tiempo realh. Conocer sus similitudes,diferencias y sus multiples
usos para detectar o cuantificar moleculas de ADN especificas.
Durante el desarrollo del TP se utilizaran ambas versiones de la tecnica de PCR
para determinar la cantidadrelativa de moleculas especificas de ADN en una
mezcla. La mezcla contiene vectores con los genes protrombina y factor V .
CRONOGRAMA
Dia 1:
Parte teorica:
1- Explicacion general de la tecnica dePCR: conceptos generales y diseno
de primers. Utilizacion de la PCR para la deteccion especifica de los genes
protrombina y factor V.
2- Explicacion general para el desarrollo del TP.
Partepractica:
1- Preparacion de la mezcla de reaccion para la PCR clasica y comienzo de
la reaccion. Los docentes retiran los tubos una vez terminada.
Dia 2:
Parte teorica:
1- Explicacion de diferentesmetodos de cuantificacion de ADN, incluyendo
las diferencias entre metodos espectrofotometricos y por PCR.
2- Explicacion general para el desarrollo del TP.
Parte practica:
1- Preparacion de geles deagarosa y corrida de la electroforesis con los
productos de PCR obtenidos la clase 1. Toma de imagenes en el G-Box e
interpretacion conjunta de los resultados.
2- Preparacion de la mezcla dereaccion para la PCR en tiempo real y
comienzo de la reaccion. Los docentes retiran los tubos y obtienen los
datos.
Dia 3:
1- Observacion de los resultados de la PCR en tiempo real. Utilizacion delsoftware y analisis de los resultados.
2- Comparacion con los resultados obtenidos por PCR clasica.
3- Consultas para la preparacion del Informe.
DETALLE DE LAS PREPARACIONES PARA EL DESARROLLO DELTP
1- Preparacion de la PCR clasica
Utilizar tubos de 0.2 ml y mantener siempre en hielo hasta el momento de la
reaccion (PCR). Como templado se utilizara 1 :l de la mezcla.
Concentracion final...