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PRÁCTICA N° 03
TEMA: DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO DE LAS PROTEÍNAS
A. Marco teórico
Las proteínas son moléculas anfóteras, es decir, según el número relativo de gruposcarboxilo y aminos libres, en solución darán reacción ácido o alcalina. En otras palabras, algunas moléculas se cargarán positivamente y otras negativamente.
El pH al cual una proteína determinada eseléctricamente neutra se conoce como punto isoeléctrico (pI), en el cual tanto el número total de cargas positivas como el número total de cargas negativas son iguales. Al encontrarse en este punto lasproteínas tienden a ser menos soluble y más fácilmente precipitables.
Para calcular el punto isoeléctrico (pI) de una proteína se realiza midiendo el pH de la solución en la cual se encuentra esta;para ello se emplea la Ecuación de Henderson-Hasselbach:
Sal
Sal
pH = pK + log
pH = pK + log
Ácido
Ácido
; pK de Ácido Acético = 4.7
B. Desarrollo de la práctica
En lapresente práctica hemos utilizado 9 tubos de ensayo a los cuales les hemos agregado los siguientes reactivos:
Procedimiento 1
Hemos agregado Ácido Acético (1N) y Agua destilada en las siguientesconcentraciones:
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
6.8 ml
6.8 ml
3.2 ml
3.2 ml
Ácido Acético
Agua destilada
Ácido Acético
Aguadestilada
Ácido Acético
Agua Destilada
Ácido Acético
Agua Destilada
Procedimiento 2
En este procedimiento extraeremos 5 ml de Solución y la verteremos en el tubo de ensayo contiguo, de lasiguiente manera:
Como primer paso extrajimos 5 ml de la solución 1 y la vertimos a la Solución 2 y así sucesivamente.
Como primer paso extrajimos 5 ml de la solución 1 y la vertimos a la Solución 2 y asísucesivamente.
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
5 ml
Extrajimos 5 ml de la Solución 9 y lo eliminamos.
Extrajimos 5 ml de la...
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