bacterias





INTRODUCCIÓN
Las tinciones hematológicas tipo Romanowsky utilizan azul de metileno y sus productos de oxidación (azur A, azur B, y azur c) como colorantes básicos, combinándolos con la eosina como colorante acido
De este modo obtenemos una tinción diferencial, es decir, que es capaz de diferenciar distintas estructuras celulares según se tiñan con el colorante acido, básico o con lamezcla de ambos
Según la proporción de azul de metileno y eosina que compongan el colorante tendremos distintos métodos de tinción. Entre ellos, los más conocidos son el método de Giemsa, de Wright, de Leishman y el panóptico de Pappenheim
METODICA
Es un extracto de las técnicas de tinción hematológicas de la casa panreac
FUNDAMENTO
Utilizamos como colorante la mezcla de azul de metileno yeosina propuesta por Giemsa






MATERIAL NECESARIO
Microscopio óptico
Portas bien limpios
Cristalizador
Puentes de tinción
Pipetas Pasteur con chupete
Frascos lavadores
Tubos de ensayo
REACTIVOS
Colorante en solución según Giemsa de panreac
Solución tampón pH 7,2 de panreac
Metanol
Aceite de inmersión
MUESTRA
Sangre capilar fresca o venosa anti-coagulada. Elanticoagulante de elección es la heparina o el EDTA, ya que el citrato sódico y el oxalato potásico pueden dar preparaciones defectuosas


TÉCNICA
Preparamos un frotis sanguíneo según la técnica descrita en la práctica anterior
Colocamos el frotis sobre el puente de tinción en el cristalizador en posición horizontal.
Cubrimos con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y dejamos secar al aire. Conesto procedemos a fijar el frotis.
Diluimos en un tubo de ensayo 0, 2 ml de azur-eosina-azul de metileno según Giemsa con 2ml de solución tampón pH 7,2. Es importante realizar esta dilución en el momento de la tinción, ya que el colorante precipita y no es válido para otro día
Mezclamos suavemente en el tubo y con una pipeta Pasteur cubrimos el frotis dejando actuar durante 25 minutosEscurrimos y lavamos con agua del grifo. Posteriormente lavamos con tampón pH 7,2 hasta eliminar los restos del colorante. Dejamos escurrir y secamos en posición vertical







PROCEDIMIENTO















PROCEDIMIENTO















PROCEDIMIENTO















LECTURA DE RESULTADOS
Una vez seca la tinción, echamos una gota de aceite deinmersión y examinamos al microscopio óptico con el objetivo de 100x
Los eritrocitos se tiñen de color rosa asalmonado y las plaquetas de color violeta
Los neutrofilos presentan el núcleo de color azul violeta, el citoplasma rosa y la granulación de un color violeta rojizo
Los eosinofilos se observan con el núcleo azul violeta, el citoplasma azul y los gránulos de color rojo anaranjado
Losbasofilos presentan un núcleo de color purpura y granulación de color azul oscuro
Los monocitos y linfocitos se observan con un núcleo color violeta y el citoplasma azul, un poco más claro en el monocito









RESULTADOS















CONCLUSIÓN

En esta práctica se debe realizar un frotis a la perfección ya que si no está perfectamente extendido, no se puedeproseguir a teñir, al realizar la tinción se debe ser cuidadoso, respetar los tiempos, ya que si no se secan bien o se deja menor tiempo, la sangre se puede correr y se arruina el frotis.
En conclusión puedo decir que la práctica se requiere de mucho cuidado y tiempo, se debe evitar fallas en esta, para así proceder a la cuenta de células, ya que esto también requiere de tiempo, por lo que debemosagilizar la técnica de tinción.













INTRODUCCIÓN
Las tinciones hematológicas tipo Romanowsky utilizan azul de metileno y sus productos de oxidación (azur A, azur B, y azur c) como colorantes básicos, combinándolos con la eosina como colorante acido
De este modo obtenemos una tinción diferencial, es decir, que es capaz de diferenciar distintas estructuras celulares según...