bacterias

Rev. Colomb. Biotecnol. Vol. IX No. 1 Julio 2007 14-21

Caracterización por Ardrea de microorganismos acidófilos
aislados en minas de oro de Marmato, Colombia
Ardrea characterisation of acidophilic micro-organisms
isolated from gold mines in Marmato, Colombia
Victor Manuel Osorio E.*, Edna Judith Márquez F.**, Marco A. Márquez G.***

RESUMEN
La bio-oxidación de minerales mejora larecuperación de metales valiosos y disminuye el impacto
negativo causado por los subproductos de las operaciones mineras, pero las interacciones de los microorganismos involucrados son poco conocidas. Con el objeto de avanzar en el estudio de interacciones
microbianas de bacterias acidófilas nativas en cultivos mixtos, en este trabajo se utilizó la siembra en
medio sólido doble capa y el análisis deenzimas de restricción del ADN ribosomal amplificado (Ardrea) con las enzimas Eco72I, Eco24I, XcmI y BsaAI para caracterizar cuatro aislados tomados de minas
de oro de Marmato, Colombia. Los aislados que oxidan hierro y azufre exhibieron patrones de restricción del gen ARNr 16S compatibles con los reportados para Acidithiobacillus ferrooxidans, aunque uno de
ellos mostró una morfología decolonia que no ha sido descrita para esta especie; el aislado que oxida
azufre mostró un patrón que coincide con el análisis teórico realizado sobre secuencias para Acidithiobacillus thiooxidans incluidas en bases de datos primarias. La técnica Ardrea permitió diferenciar entre
At.ferrooxidans y At.thiooxidans, y verificar si la identidad de los aislados correspondía con sus característicasfisiológicas y la morfología de sus colonias.
Palabras clave: Ardrea, ARNr 16S, microorganismos acidófilos, identificación molecular, polimorfismos
de colonia, medio sólido doble capa.
ABSTRACT
Mineral bio-oxidation improves the extraction of valuable metals and also decreases the impact caused by mining waste; however, the interactions between the micro-organisms so involved are little
known.Double-layer solid culture media techniques and amplified ribosomal DNA restriction enzyme
analysis (Ardrea), using Eco72I, Eco24I, XcmI and BsaAI enzymes, were used for characterising four micro-organisms isolated from gold mines located in Marmato, Colombia. This work was aimed at better
understanding of native acidophilic micro-organisms’ microbial interactions in mixed cultures. Iron
and sulphuroxidising isolates revealed similar restriction patterns to those previously reported for
Acidithiobacillus ferrooxidans; however, one of them exhibited different colony morphology compared to
previously reported morphology. The iron non-oxidising isolate presented a restriction pattern agree-

*
**

Candidato a M. Sc. Biotecnología, Laboratorio de Microbiología Industrial, UniversidadNacional de Colombia, sede Medellín.
vmosorio@unalmed.edu.co

M. Sc. Biología, estudiante doctorado, Laboratorio de Biología Molecular y Celular, Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín.
ejmarque@unal.edu.co
*** Ph. D. Mineralogía, Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín. mmarquez@unalmed.edu.co

14

CARACTERIZACIÓN POR ARDREA DE MICROORGANISMOS ACIDÓFILOS AISLADOS EN MINAS DEORO
ing with theoretical analysis of Acidithiobacillus thiooxidans database sequences. ARDREA proved to be
a viable technique for differentiating between At. ferrooxidans and At. thiooxidans; in turn, it enabled
checking isolates’ identity with their physiological traits and colony morphology.
Key words: Ardrea, rRNA 16S, acidophilic microorganisms, molecular identification, colonypolymorphisms, double layer solid medium

Recibido: marzo 5 de 2007

Aceptado: junio 13 de 2007

INTRODUCCIÓN
La bio-oxidación es una técnica que se puede utilizar como un tratamiento viable antes de la cianuración para mejorar la recuperación de oro (Canales
et ál., 2002) y la extracción de otros metales (Solisio et ál., 2002). Esta oxidación es catalizada
principalmente por microorganismos...