Biologia molecular

Cuestionario
1. Mecanismos bioquímicos involucrados en cambios de pH en las 3 pruebas.
Antes de empezar con las explicaciones del descenso de pH, definiremos pH para una mejor comprensión del experimento:
En 1909, Sörensen definió que el pH es el logaritmo negativo de la concentración de ion hidrogeno.
Azida
La azida es un inhibidor del complejo IV de la cadena de transporte de electrones.Lo que hace es inhibir el complejo IV impidiendo la formación de agua y el desecho de los electrones que pasaron por los otros tres complejos de la cadena de transporte de electrones, haciendo que el complejo I y III sigan bombeando protones (H+) hacia el espacio intermembranal de la mitocondria; al estar inactivo el complejo IV se lleva a una acumulación de protones (H+), lo que hace que sevuelva cada vez más ácido haciendo que disminuya el pH de la levadura.
En la prueba de azida y la levadura Sacharomices Cerevisiae, se pudo observar la acción de la azida en la cadena de transporte de electrones.
Al principio cuando a la levadura Sacharomices Cerevisiae se le agregó la azida no hubo un cambio de pH porque la cadena de transporte de electrones no estaba funcionando ya que la levaduraSacharomices Cerevisiae no tenia energía para ponerla a funcionar.
Cuando se le agrega la energía (glucosa) se ve claramente como el pH de la levadura Sacharomices Cerevisiae comienza a descender porque el complejo IV de la cadena de transporte de electrones está siendo inactivado por la azida, provocando la acumulación de protones (H+) bombeados al espacio intermembranal (del complejo I: NADHdeshidrogenasa, por cada NADH reducido se bombean 4H+; del complejo III: Ubiquinona-Citocromo oxidoreductasa bombea 4H+ hacia el espacio intermembranal por cada NADH o FADH2 oxidado).
Dinitrofenol
El dinitrofenol es un ácido débil que capta un protón del espacio intermembranal (lado P de la membrana) que tiene una alta concentración de protones y lo transporta a través de la membrana hacia lamatriz (lado N de la membrana) en donde el protón se disocia debido a la baja concentración de protones ahí existente. Esto quiere decir que el dinitrofenol hace que la membrana interna de la matriz mitocondrial se vuelva porosa, lo que hace que los protones se transporten hacia dentro de la matriz por la ATP sintasa generando la producción de ATP necesaria para tener energía en el organismo.
Alperforar la membrana interna de la mitocondria esta generación de energía por parte de la ATP sintasa queda inhibida por lo que no hay una producción de energía y esto por lo tanto, puede llegar a la muerte.
Entonces si los protones (H+) que se encuentran en el espacio intermembranal, pasan hacia la matriz mitocondrial por estos poros para su posterior disociación lo que hace que el pH disminuyavolviéndose más alcalino. Pero los complejos no se ven afectados por el dinitrofenol, así que siguen bombeando protones (H+) hacia el espacio intermembranal para después regresar a la matriz mitocondrial, entonces esto con el tiempo hace que la concentración de protones en la matriz mitocondrial sea un poco más constante provocando que se evite la disociación de los protones (H+), provocando que elnivel de acidez aumente y el pH disminuya.
Control con glucosa
En esta prueba a la levadura Sacharomices Cerevisiae en los primeros minutos se le agregó H2O y se tomo el pH el cual no cambio; esto se debe a que para que la cadena de transporte de electrones funcione se necesita de la presencia de energia para que se produzca los poderes reductores (NADH+ y FADH2), y así empiece elfuncionamiento de los complejos que integran la cadena de transporte de electrones.
Después de tomar el pH con la Sacharomices Cerevisiae y el H2O, se agregó glucosa al 10% y se noto desde la primera medida de pH que el mismo estaba decendiendo.
Al agregar la glucosa (energia) a la Sacharomices Cerevisiae hizo que se activara su metabolismo (ciclo de krebs) para producir NADH+ y FADH2 que posteriormente...