Biologia Molecular

d. What method was used to separate the DNA molecules by density?
Para separar las moleculas por densidad ellos primero consideraron el uso de 5 bromouracilo (5BU) pero sepreocuparon por los efectos nocivos de su mutagenicidad y toxicidad celular. Así, que decidieron utilizar un medio de crecimiento sintético en el que la única fuente denitrógeno fue 15NH4Cl. Crecieron la E. coli en medios que contienen cloruro de N15-amonio, este es un isótopo pesado de nitrógeno que existe normalmente como N14, como la única fuentede N durante 14 generaciones. Como resultado, el ADN en el cultivo fue completamente marcada con el isótopo pesado N15.
f. Explain the banding patterns expected forconservative, semiconservative and random dispersive replication in the Meselson-Stahl experiment. (10 pts)
En el modelo conservador de la replicación del ADN en el experimento deMeselson-Stahl, la cadena parental se mantendría constante durante varias generaciones. Como resultado tenemos que la banda en la posición N15 continuaría, a pesar de que se convertiríaen una parte cada vez menor de la población total de moléculas de ADN.
En el modelo de la replicación semiconservativa de ADN en el experimento de Meselson-Stahl se suponeque el experimento de Meselson-Stahl las dos hebras de ADN se separan y cada una sirve como una plantilla para sintetizar la cadena complementaria. El resultado de la síntesisson dos moléculas que tienen una cadena original y un recién sintetizado.
En el modelo de dispersión aleatoria de la replicación del ADN en el experimento de Meselson y Stahl,el ADN parental se divide sobre las moléculas hijas durante cada ciclo de replicación, por lo tanto la población N15 se perdería, y no aparecería la población pura N14.