Biometria Hematica

BIOMETRIA HEMATICA

Determinación de Hemoglobina Generalidades:

La hemoglobina es una proteína que contienehierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxígeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. La hemoglobina también transporta el dióxido de carbono, que es el producto de desecho delproceso deproducción de energía. La forman cuatro cadenas polipeptídicas (globinas) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo átomo de hierro es capaz de unirse de forma reversible al oxígeno. El grupo hemo se forma por:

1. Unión de laSuccinilCoA (formado enciclo de Krebso ciclo del ácido cítrico) a un aminoácidoglicinaformando un grupopirrol.

2.Cuatro grupos pirrol se unen formando la ProtoporfirinaIX.

3.La protoporfirina IX se une a una molécula de hierro ferroso(Fe
2+) formando el grupo hemo.

Cuando la hemoglobina está unida al oxígeno, se denomina oxihemoglobina o hemoglobina oxigenada, dando el aspecto rojo o escarlata intenso característico de la sangre arterial. Cuando pierde el oxígeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo oscuro o bordó de la sangrevenosa (se manifiesta clínicamente por cianosis).Oxihemoglobina (HbO 2): Hb unida al oxígeno.
Desoxihemoglobina: Desoxigenada (Hb reducida)
Carboxihemoglobina: Hb unida a CO2. Letal en grandes concentraciones. Carbaminohemoglobina o carbohemoglobina:
Ciertos aminoácidos de la Hb se asocian al CO2.
Metahemoglobina : Hb con Fe3 (oxidado), así no se une al oxígeno.
Hemoglobina glucosilada (HbA 1c): Glucosa unida a valina terminal de cadena Beta. Aumenta en diabetes mal controlada.

MATERIALES UTILIZADOS:

•Boquilla con ligadura
•tubos de ensayo
•Pipetas de shali
•colorímetro
•Cubetas para colorimetría
•Reactivo de cianometa
•Estándar equivalente a 20 mg de hemoglobina/dl.
•Sangre total anticoagulada con EDTA.

TECNICA:

-Tener limpio todo el material a usar.
-Colocar laboquilla a la pipeta y absorber, hasta 5 micras de sangre
-Vaciar el contenido de la pipeta a un tuvo que contiene 5 ml. Decianometa.
-Tapar el tubo invertirlo dando un giro de 260° y dejar reposar 10minutos.-pasado los 10 min. Ni un minuto más y ni un minuto menos, vaciar elcontenido a la cubeta dejando un dedo libre de espacio
-- Meterlo al colorímetro que en el ya tiene adentro una cubetaconcianometa, y esta a una frecuencia de luz de 420, meterlo mirando lasrayas de la cubeta así a ti mismo.
- leer lo marcado en el colorímetro, y reportarlo.

Determinación de Hematocrito

Generalidades:
El hematocrito es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa la fracción de los glóbulos rojos. Las cifras normales de hematocrito en personas oscilan entre: Hombres: de 40.7 a 50.3%Mujeres: de 36.1 a 44.3 %Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiológicos, como la edad y la condición física del sujeto, como también del laboratorio donde se realiza el examen.
Valores bajos de Hematocrito
están asociados a múltiples posibilidades: desde anemia, hasta leucemia o artritis reumatoide A, entre otras.
Valores altos de Hematocrito
se pueden asociar adeshidratación, eritrocis o hipoxia, entre varios.
Se define como la relación entre el volumen de GR con el de sangre entera.

•El hematocrito venoso coincide estrechamente con el obtenido por punción cutánea.

•Se puede medir directamente por centrifugación con macro método o micro método.

•Indirectamente por VCM x recuento de hematíes en aparatosautomáticos.El HCT puede determinarse por métodosmanuales o por métodosautomáticos.Los métodos manuales consisten en la centrifugación de la sangre,aplicándola una fuerza de 2.000 a 5.000 g (macrometodo) o de 12.000a 15.000 g (micrometodo).Los métodos automáticos pueden basarse en 2 principios:

•El calculo matemático del HCT a partir de los valores de RBC y devolumen corpuscular medio, obtenidos electrónicamente conanterioridad.

•El...