BIOQUI 6

I. INTRODUCCIÓN:
Determinar la concentración de proteínas en una muestra biológica es una técnica de rutina básica cuando se aborda un esquema de purificación de una proteína concreta, cuando sequiere conocer la actividad específica de una preparación enzimática, para el diagnóstico de enfermedades, así como para otros muchos propósitos.
Existen diferentes métodos para la cuantificaciónde proteínas. Muchos de estos métodos se basan en:
La propiedad intrínseca de las proteínas para absorber luz en el UV, para la formación de derivados químicos, o la capacidad que tienen lasproteínas de unir ciertos colorantes.
Existe una relación de proporcionalidad entre coloración de una sustancia y su concentración cuando se ajustan a la Ley de Lambert y Beer. Así, a mayor concentraciónmayor absorbancia, pero muchos compuestos entre ellos los líquidos biológicos no son coloreados, y si lo son, su interfiere en el análisis.
La concentración de una sustancia desconocida oproblema se puede determinar mediante se puede determinar mediante el método del Factor de Calibración.



Con el factor de calibración se puede fácilmente determinar la concentración de una muestra deconcentración desconocida si se conoce la absorbancia.
II. RESULTADOS
Las absorbancias del tubo estándar y muestra.


Blanco
Estándar
Muestra
Absorbancia
0.072
0.218
0.126

Solución Stock 10mg%100mg……………………….. 100ml
Xmg……………………………0.6ml
X=0.6ml
Solución Estándar 0.6ml
0.6mg…………………………100ml
X mg……………………………3ml
X= 1.8×10-2ml
1.8×10-2mg…………………….4.5ml (tubo st)
X mg………………………………..1ml
X=4×10-3mgHallamos la concentración del tubo muestra en mg/ml:


La cantidad de 0.0022mg del metabolito proviene de 1ml del filtrado.
0.0023mg………………………1ml
Xmg……………………………..4.5ml X = 0.010mg…….3ml filtrado0.010mg…………………3ml filtrado
X mg…………………2ml filtrado X=0.007mg…….2ml de sangre

Se halla la concentración del metabolito en la sangre
0.007mg………………..2ml
X mg…………………100ml(1 dl)...