ciencia

PROCEDIMIENTO:

Para la práctica de laboratorio “Extracción de ADN” se colocó un tubo de ensayo con 2 ml de etanol absoluto en un baño de agua con hielo, mientras se realizaban los siguientespasos.

Utilizando un palillo de dientes, se realizó un raspado varias veces en la cara interna de la mejilla para extraer el ADN de la cavidad oral de un compañero voluntario, se colocaron lasmuestras en un tubo de ensayo con tapa rosca (tubo plástico Falcón) con 10 ml de agua destilada estéril, posteriormente se agito varias veces para retirar las células del palillo y así tener solamente elADN. Las muestras se sometieron a centrifugación a 3000 rpm por 10 minutos. Se eliminó el sobrenadante volteando rápidamente el tubo una sola vez, a continuación se adicionaron 500 l (0.5 mL) desolución de lisis al botón de células de la mucosa oral, inmediatamente, se mezcló y se dejó en reposo durante 5 minutos. Seguidamente, se añadió la solución de lisado celular suavemente al tubo de ensayoque contenía el alcohol muy frío dejándola resbalar por la pared del tubo inclinado, se dejó reposar la muestra alrededor de 2 ó 3 minutos sin moverla en absoluto.
Debido a la diferencia de densidad,el alcohol formo un sobrenadante por encima de la fase acuosa en la que se encontraba el ADN en disolución provocando que éste se precipitara, mientras el ADN precipitaba en la interfacealcohol-agua, se esperó por unos minutos y se observó la formación de una masa blanquecina que ascendió lentamente formando un grumo de aspecto algodonoso o motoso. En la interface se introdujo con mucho cuidadola varilla de vidrio o la pipeta Pasteur en el tubo para recoger el ADN, girándolo lentamente mientras se extraía del tubo. En el ADN extraído se observó un aspecto viscoso y de color blanquecino, elcual se sumergió en un tubo eppendorf con 500 ml de etanol al 70% para su conservación.
Nuevamente se centrifugaron las muestras por 5 minutos a 12000 rpm, se eliminó el sobrenadante y se dejó...