ciencias

UNIVERSIDAD ESTATL PENINSULA DE SANTA ELENA
FACULTAD DE CIENCIAS DEL MAR
ESCUELA BIOLOGIA MARINA 4/1
MICROBIOLOGIA
VISITA AL CENAIM – ESPOL
Integrantes:
Darwin Apolinario
Carolina EspinozaPaulina López
EXTRACCION DE ADN BACTERIANO
Objetivo:
1. Utilizar técnicas sencillas para poder extraer el ADN de una cepa bacteriana cualquiera.
2. Observar la estructura fibrilar del ADN.
3.Analizar por PCR.
Informe de la práctica:
En PCR, el ácido desoxirribonucleico (ADN) es el analito. Por tanto, una buena muestra implica siempre un correcto proceso de obtención de esta molécula apartir de material biológico.
La extracción de ADN consta de una etapa de lisis, que consiste en romper las estructuras que confinan el citoplasma y liberar al medio su contenido y otra depurificación, que implica la retirada de la solución final de la mayoría de elementos que pueden interferir en la PCR.
De los tres pasos críticos que componen el análisis de patógenos por PCR, la extracción deADN es quizás el más desconocido y sobre el que más control podemos ejercer.
La extracción del ADN de las células o virus donde se halla confinado es un paso previo en muchos procedimientosanalíticos y diagnósticos.
Etapas en la extracción de ADN
Los pasos necesarios para una correcta extracción y purificación del ADN mediante un procedimiento químico son:
1. Lisis de las células o virus.Las sales caotrópicas ayudan a romper la estructura tridimensional de macromoléculas como las proteínas o los ácidos nucleicos consiguiendo su desnaturalización. La adición de un detergente como elSDS es necesaria a menudo para eliminar las membranas.
2. Degradación de la fracción proteica asociada al ADN.
Se consigue mediante la adición de una proteasa. La fracción proteica puedeprecipitarse mejor con la ayuda de sales como el acetato de amonio o el acetato sódico.
3. Purificación. Consta de 3 fases:
• Precipitación del ADN.
El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se puede...