Cinetica Enzimatica

Páginas: 13 (3027 palabras) Publicado: 15 de abril de 2012
Instituto Tecnológico de la Paz

* Paulina Annette Ortega Flores

* Bioquímica I

* Reporte de practica #1

Factores que afectan la velocidad de una reacción enzimática

La Paz, Baja California Sur a 01 de Octubre del 2010.

Ortega Flores Paulina Annette
Instituto Tecnológico de la Paz
Laboratorio de Bioquímica
24 de Septiembre del 2010

La enzima a-amilasa, presente enla saliva, inicia la degradación del almidón, la principal fuente de carbohidratos de la dieta humana. Esta enzima hidroliza al azar los enlaces a (1è4) que unen residuos de glucosa en el almidón, a excepción de los enlaces cercanos a los extremos y a los puntos de ramificación de las cadenas. Por la acción de esta enzima activada por iones cloruro, en la boca la longitud de la cadena del almidónse reduce de varios miles a unas ocho unidades de glucosa. El almidón al ser tratado con una solución de yodo da un complejo de coloración azul, así la acción de la a-amilasa sobre polisacáridos puede ser seguida midiendo la decoloración del complejo azul hasta alcanzar el punto acrómico (solución incolora).
Los factores que afectan la velocidad de una reacción enzimática son:
a) Concentraciónde la enzima
b) Temperatura
c) pH

a) Concentración de la enzima:
Uno de los factores que afecta a la velocidad de una reacción catalizada por una enzima purificada in vitro es la concentración de sustrato presente. La concentración de sustrato cambia en el transcurso de una reacción a medida que el sustrato se convierte en producto. La velocidad es mayor cuando la concentración de sustratoes generalmente mayor que la concentración de la enzima.
b) Influencia de la temperatura sobre la velocidad de la acción enzimática:
Las graficas de velocidad frente a temperatura de muchas enzimas revelan una curva en forma de campana con un óptimo entre 40°C y 45°C para las enzimas de mamíferos. Por encima de esta temperatura se produce desnaturalización térmica de la enzima. Entre 0°C y 40°Cmuchas enzimas muestran un incremento en la temperatura. Esto quiere decir que por debajo de la temperatura optima, la velocidad es menor porque la temperatura es demasiado baja para proporcionar suficiente energía cinética para superar la energía de activación, y por el contrario por arriba de la temperatura optima, la enzima se inactiva por desnaturalización térmica.
c) Influencia del pH sobrela velocidad de reacción enzimática:
Las enzimas tienen un pH óptimo o un intervalo de pH en el que su actividad es máxima, a valores superiores o inferiores de pH la actividad disminuye. El pH depende mucho de qué tipo de enzima está presente. La variación de la curva acampanada depende del estado particular de ionización del sustrato que estará unido de manera optima a la enzima; esto a su vezestá relacionado con la ionización de aminoácidos específicos que constituyen el centro de fijación del sustrato, además aquellos aminoácidos implicados en la catálisis de la reacción deben estar, para ser funcionales, en el estado iónico correcto. Los estudios de la dependencia respecto al pH de las enzimas son útiles para sugerir que aminoácido o aminoácidos pueden ser operativos durante elproceso catalítico.

Durante el desarrollo de la práctica utilizaremos la prueba de lugol o prueba de yodo y es necesario conocer su funcionamiento. Es una solución de I2 y KI en agua destilada, el color que presenta es marrón y sirve para identificar polisacáridos, como almidón, glucógeno, formando un complejo termolábil, que se caracteriza por ser colorido, dando distintos colores según lasramificaciones que presente la molécula. No reacciona con azucares simples como la glucosa o fructosa. El color que presenta ante la presencia de almidón es azul.

Planteamiento del problema:
Determinar experimentalmente el efecto de la concentración de la enzima, de la temperatura y pH sobre la velocidad de una reacción.

Hipótesis:
Cuando hablamos de la influencia de la concentración de la...
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