Cinética De Hidrólisis Del Almidón

OBJETIVOS
Analizar la cinética de hidrólisis del almidón por la alfa amilasa.
Extraer una enzima directamente de una fuente biológica

INTRODUCCIÓN
La saliva es una mezcla derivada de la secreción de 3 pares de glándulas, las parótidas, submaxilar y sublingual, como también de pequeñas glándulas mucosas ubicadas difusamente sobre la mucosa de la boca.

La cantidad normal secretada en unapersona adulta es de 1 a 1,5 Iitros en 24 horas. La composición de la saliva es un 99,5% H2O y 0,5 % de sólidos orgánicos e inorgánicos, el pH oscila entre 6,2 y 7,4. Los principales componentes orgánicos son las glicoproteínas, proteínas (albúmina, globulinas) y carbohidratos.
Los componentes inorgánicos principales son calcio, sodio, potasio, magnesio y fósforo.

La secreción pancreática es unlíquido acuoso no viscoso, que tiene un contenido de H2O semejante al de la saliva y que lleva cierta cantidad de proteínas y compuestos inorgánicos, principalmente Na+, K+, HCO3- y Cl-, además están presentes en pequeñas cantidades Ca+2, Zn+2 y HPO4-2. El pH del jugo pancreático es claramente alcalino de 7,5 a 8,0 o mayor. En la secreción pancreática se encuentran numerosas enzimas, la tripsina,amilasa, carboxipeptidasa, lipasa y otras.

La enzima α-amilasa, presente en la saliva, inicia la degradación del almidón, la principal fuente de carbohidratos de la dieta humana. Esta enzima hidroliza al azar los enlaces α (1è4) que unen residuos de glucosa en el almidón, a excepción de los enlaces cercanos a los extremos y a los puntos de ramificación de las cadenas. Por la acción de estaenzima activada por iones cloruro, en la boca la longitud de la cadena del almidón se reduce de varios miles a unas ocho unidades de glucosa. La alta concentración de protones del estómago inactiva la α-amilasa salival.

El almidón y dextrinas complejas al ser tratados con una solución de yodo dan un complejo de coloración azul, mientras que las dextrinas más simples, la maltotriosa y maltosa nodan una reacción positiva. Así, la acción de la α-amilasa sobre polisacáridos puede ser seguida midiendo la decoloración del complejo azul hasta alcanzar el punto acrómico (solución incolora).
La maltosa y otros carbohidratos reductores producidos en la reacción pueden ser detectados por el test de Benedict. Este método es cualitativo, consiste en una solución alcalina de Cu2+ que se encuentraformando un complejo con citrato.
El ión cúprico es reducido a Cu1+ por compuestos reductores con formación de hidróxido cuproso amarillo o de óxido cuproso rojo. El cambio de coloración o la formación de un precipitado rojo-ladrillo (Cu2O) indica la presencia de un compuesto reductor.
CÁLCULOS
*Fosfato de sodio monobásico 0.2 M
KH2PO4
PM= 136 g/mol V=250 ml>>>0.25 L
M=n/L
Despejamos n y sustituimos:
n=0.05 moles
Si un mol equivales a 136 g, entonces 0.05 moles equivalen a 6.8 g.
*NaOH 0.2 M
PM= 49 g/mol V=250 ml>>> 0.25 L
M=n/L
Despejamos n y sustituimos:
n=0.05 moles
Si un mol equivales a 40 g, entonces 0.05 moles equivalen a 2 g.
RESULTADOS.
|Ph |# pozos |
|5.47 |26|
|*5.7 |- |
|5.9 |9 |
|6.4 |13 |
|**6.9 |- |
|7.6 |5 |
|7.9 |10 |
|8.5 |24 |

*El pH 5.7 no se tomó porque teníamos solo 7 placas de aglutinación.
**El pH 6.9 no se tomó porque despuésde haber agregado muestra a 36 pozos, no mostraba cambio alguno.
ANÁLISIS DE RESULTADOS.
Construir una gráfica de tiempo para alcanzar el punto acrómico contra pH.
[pic]
Indica ¿Qué significado tienen los resultados?
Según los resultados obtenidos, el pH en el que se producía con mucha más velocidad de hidrólisis era el pH que se acercaba más a la neutralidad en los valores básicos....