Coliformes totales

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PARÁMETRO COLIFORMES FECALES MÉTODO FILTRACION POR MEMBRANA
CONCEPTO El grupo de bacterias coliformes fecales para la técnica de filtración por membrana se define como todos los bacilos gramnegativos, aeróbicos y algunos anaeróbicos facultativos, no formadores de endosporas, que cuando se incuban en medio M-FC con lactosa por 24 hs a 44.5 ± 0.2 ºC desarrollan colonias color azul.
MATERIALES •Equipo de filtración: embudo y platina porosa que se puedan trabar entre sí y sean autoclavables; bomba de vacío; kitasato de 1 litro; trampa de agua entre el kitasato y la bomba de vacío.
• Balanzascon una sensibilidad de por lo menos 10 mg.
• Incubadoras de 35 ± 0.5ºC.
• Equipo de recuento: microscopio binocular con un aumento de 10 a 15X y una fuente de luz fluorescente posicionada formandoun ángulo de 60-80º con la placa. (De preferencia).
• Autoclave
• Mecheros
• Placas de Petri estériles, de plástico descartables o de vidrio de 50 mm de diámetro aproximadamente u otro tamañoadecuado.
• Filtros de nitrocelulosa cuadriculados estériles de 0.45 mm ± 0.02 mm de diámetro de poro. Libre de glicerina y sin áreas hidrofóbicas.
• Pinzas de acero inoxidable para filtros, sinextremidades rugosas.
• Tubos de ensayo de vidrio estériles para diluciones con tapa de algodón o de rosca.
• Pipetas de vidrio graduadas estériles.
• Materiales de vidrio para preparación del medio decultivo.
• Termómetros calibrados para controlar la incubadora de coliformes.
REACTIVOS • Agua peptonada estéril al 1% y pH neutro.
• Etanol al 95%
• Medio de cultivo líquido M-Endo
• Agar
• Aguadestilada
ENVASADO Y PRESERVACIÓN La muestra debe ser colectada en frascos de vidrio o de polipropileno autoclavable, de boca ancha estériles. No debe llenarse el frasco por completo, debe quedar unacámara de aire para poder homogeneizar la muestra antes de procesarla. La misma debe conservarse a 4ºC hasta ser analizada. El período máximo de conservación de la muestra en frío es de 6 - 8...
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