Coliformes totales
Páginas: 4 (884 palabras)
Publicado: 4 de marzo de 2012
PARÁMETRO COLIFORMES FECALES MÉTODO FILTRACION POR MEMBRANA
CONCEPTO El grupo de bacterias coliformes fecales para la técnica de filtración por membrana se define como todos los bacilos gramnegativos, aeróbicos y algunos anaeróbicos facultativos, no formadores de endosporas, que cuando se incuban en medio M-FC con lactosa por 24 hs a 44.5 ± 0.2 ºC desarrollan colonias color azul.
MATERIALES •Equipo de filtración: embudo y platina porosa que se puedan trabar entre sí y sean autoclavables; bomba de vacío; kitasato de 1 litro; trampa de agua entre el kitasato y la bomba de vacío.
• Balanzascon una sensibilidad de por lo menos 10 mg.
• Incubadoras de 35 ± 0.5ºC.
• Equipo de recuento: microscopio binocular con un aumento de 10 a 15X y una fuente de luz fluorescente posicionada formandoun ángulo de 60-80º con la placa. (De preferencia).
• Autoclave
• Mecheros
• Placas de Petri estériles, de plástico descartables o de vidrio de 50 mm de diámetro aproximadamente u otro tamañoadecuado.
• Filtros de nitrocelulosa cuadriculados estériles de 0.45 mm ± 0.02 mm de diámetro de poro. Libre de glicerina y sin áreas hidrofóbicas.
• Pinzas de acero inoxidable para filtros, sinextremidades rugosas.
• Tubos de ensayo de vidrio estériles para diluciones con tapa de algodón o de rosca.
• Pipetas de vidrio graduadas estériles.
• Materiales de vidrio para preparación del medio decultivo.
• Termómetros calibrados para controlar la incubadora de coliformes.
REACTIVOS • Agua peptonada estéril al 1% y pH neutro.
• Etanol al 95%
• Medio de cultivo líquido M-Endo
• Agar
• Aguadestilada
ENVASADO Y PRESERVACIÓN La muestra debe ser colectada en frascos de vidrio o de polipropileno autoclavable, de boca ancha estériles. No debe llenarse el frasco por completo, debe quedar unacámara de aire para poder homogeneizar la muestra antes de procesarla. La misma debe conservarse a 4ºC hasta ser analizada. El período máximo de conservación de la muestra en frío es de 6 - 8...
CONCEPTO El grupo de bacterias coliformes fecales para la técnica de filtración por membrana se define como todos los bacilos gramnegativos, aeróbicos y algunos anaeróbicos facultativos, no formadores de endosporas, que cuando se incuban en medio M-FC con lactosa por 24 hs a 44.5 ± 0.2 ºC desarrollan colonias color azul.
MATERIALES •Equipo de filtración: embudo y platina porosa que se puedan trabar entre sí y sean autoclavables; bomba de vacío; kitasato de 1 litro; trampa de agua entre el kitasato y la bomba de vacío.
• Balanzascon una sensibilidad de por lo menos 10 mg.
• Incubadoras de 35 ± 0.5ºC.
• Equipo de recuento: microscopio binocular con un aumento de 10 a 15X y una fuente de luz fluorescente posicionada formandoun ángulo de 60-80º con la placa. (De preferencia).
• Autoclave
• Mecheros
• Placas de Petri estériles, de plástico descartables o de vidrio de 50 mm de diámetro aproximadamente u otro tamañoadecuado.
• Filtros de nitrocelulosa cuadriculados estériles de 0.45 mm ± 0.02 mm de diámetro de poro. Libre de glicerina y sin áreas hidrofóbicas.
• Pinzas de acero inoxidable para filtros, sinextremidades rugosas.
• Tubos de ensayo de vidrio estériles para diluciones con tapa de algodón o de rosca.
• Pipetas de vidrio graduadas estériles.
• Materiales de vidrio para preparación del medio decultivo.
• Termómetros calibrados para controlar la incubadora de coliformes.
REACTIVOS • Agua peptonada estéril al 1% y pH neutro.
• Etanol al 95%
• Medio de cultivo líquido M-Endo
• Agar
• Aguadestilada
ENVASADO Y PRESERVACIÓN La muestra debe ser colectada en frascos de vidrio o de polipropileno autoclavable, de boca ancha estériles. No debe llenarse el frasco por completo, debe quedar unacámara de aire para poder homogeneizar la muestra antes de procesarla. La misma debe conservarse a 4ºC hasta ser analizada. El período máximo de conservación de la muestra en frío es de 6 - 8...
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