Coliformes

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2.5 Determinar coliformes por NMP de acuerdo a la norma
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coliforme
La denominación genérica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas que tienen ciertas características bioquímicas en común e importancia relevante como indicadores de contaminación del agua y los alimentos.coliforme significa con forma de coli, refiriéndose a la bacteria principal del grupo, la escherichia coli, descubierta por el bacteriólogo alemán theodor von escherich en 1860. von escherich la bautizó como bacterium coli ("bacteria del intestino", del griego κολον, kolon, "intestino"). con posterioridad, la microbiología sistemática nombraría el género escherichiaen honor a su descubridor.-------------------------------------------------
Caracteres bioquímicos
El grupo agrupa a todas las bacterias entéricas que se caracterizan por tener las siguientes propiedades bioquímicas:
1. ser aerobias o anaerobias facultativas;
2. ser bacilos gram negativos;
1. no ser esporógenas;
2. fermentar la lactosa a 35 °c en 48 horas, produciendo ácido láctico y gas.

Prueba de coliformestotales
1. prueba presuntiva
•caldo lauril triptosa (clt).
•caldo mc. conkey.
•caldo lactosa.
•medio ec.
2. prueba confirmativa:
•medio ec.
•mediobilis lactosa (blvb)

Metodo del NMP
El método del número más probable fue descrito por Mc Crady en 1915 y actualmente sigue siendo ampliamente utilizado. En un principio este método fue empleado para estimar el número de microorganismos en muestrasde alimentos y aguas. Sin embargo, se ha demostrado que también puede ser aplicado para la determinación de microorganismos aerobios y anaerobios en lodos, sedimentos marinos y suelos contaminados, por tanto este método es aplicable para estimar el número de microorganismos en muestras de suelo y agua, tanto para bacterias aerobias como anaerobias.
Los Coliformes Fecales son un subgrupo de losColiformes totales, capaces de
fermentar la lactosa a 44º C en vez de 37 ºC como lo hacen los totales.
Aproximadamente el 95% del grupo de los Coliformes presentes en heces están formados por Escherichia coli y ciertas especies de Klebsi ella. Ya que los Coliformes Fecales se encuentran casi exclusivamente en las heces de los animales de sangre caliente, se considera que reflejan mejor lapresencia de contaminación fecal. Éstos últimos se denominan termo tolerantes por su capacidad de soportar temperaturas más elevadas. Esta es la característica que diferencia a Coliformes Totales y Fecales. La capacidad de los Coliformes fecales de reproducirse fuera del intestino de los animales homeotérmicos es favorecida por la existencia de condiciones adecuadas de materia orgánica, pH, humedad.Desde hace mucho tiempo se han utilizado como indicador ideal de contaminación fecal. Su presencia se interpreta como una indicación de que los organismos patógenos pueden estar presentes y su ausencia indica que el agua o el alimento estudiado se hallan exentos de organismos productores de enfermedades.
Alimentos

Preparación de la muestra.

Moler 10.0 gramos de la muestra en un picador 2 veceso con cubiertos estériles y mezclar.

Adicionar el alimento a 90.0 mL de agua peptonada al 0.1 %, licuar y dejar en
reposo de 2-3 minutos.

Realizar diluciones hasta 10- 3 g/mL con agua peptonada al 0.1 %. En caso de
trabajar con muestras congeladas, descongelarlas previamente entre 2° y 5 ° C.

* Prueba presuntiva.

Añadir 1.0 mL de la dilución 10- 1 g/mL a cada uno de 3 tubos con10.0 mL de caldo lauril sulfato de sodio.

Añadir 1.0 mL de las diluciones 10- 2 g/mL y 10- 3 g/mL a dos series de 3 tubos cada una con caldo lauril sulfato de sodio.

Incubar a 35-37°C durante 24-48 h.

Los tubos después de la incubación, se registrarán como positivos si presentan crecimiento y producción de gas.

Prueba confirmativa de microorganismos coliformes totales

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