coliformes

Método de bca
FUNDAMENTO
SE BASA EN EL PRINCIPIO DE QUE LAS PROTEÍNAS REDUCEN LOS IONES CÚPRICOS A IONES CUPROSOS BAJO CONDICIONES ALCALINAS. LOS IONES CUPROSOS REACCIONAN CON EL BCA(VERDOSO) PARA FORMAR UN COLOR MORADO. EL COLOR FORMADO ES PROPORCIONAL AL CONTENIDO PROTÉICO DE LA MUESTRA


El ácido bicinconínico, sal sódica, es un compuesto capaz de formar un complejo púrpura intensocon inones Cu1+en medio alcalino. Este reactivo forma la base de un método analítico capaz de monitorizar el ión cuproso producido en una reacción entre las proteínas con Cu2+en medio alcalino(reacción de Biuret). La estabilidad del reactivo y el cromóforo proporciona un método para la cuantificación de proteínas que es sencillo, rápido, muy sensible, y que muestra una gran tolerancia acompuestos que afectan a otros métodos.

CARACTERÍSTICAS / BENEFICIOS

Colorimétrico: Se puede medir con un espectrofotómetro standard o con un lector de placas (562nm)

Gran uniformidad:– Menorvariación de proteína a proteína que los métodos de unión a cromógenos

Compatible – No se ve afectado por la mayor parte de los detergentes iónicos y no iónicos

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En caso de necesitarlo se dispone dekits para retirar estos detergentes
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También hay kits compatibles con agentes reductores


Rápido: Mucho más sencillo y cuatro veces más rápido que el clásico método de Lowry

Granlinealidad: Rango de trabajo lineal: 20 to 2000µg/mL

Gran sensibilidad: Detecta por debajo de 5µg/mL with el protocolo reforzado "enhanced"


APLICACIONES

Interacciones entre proteínas
Medir lasfracciones de las columnas después de una cromatografía de afinidad
Expresión de proteínas
ventajas
SENSIBILIDAD COMPARABLE A LA DEL MÉTODO DE LOWRY (0.5mg a 10mg)
LA MEZCLA EN UN PASO ES MÁS FÁCIL QUEEN EL MÉTODO DE LOWRY
EL REACTIVO ES MÁS ESTABLE QUE EL REACTIVO DE LOWRY
LAS SALES DE BUFFER Y DETERGENTE NO IÓNICO NO INTERFIEREN CON LA REACCIÓN
LAS CONCENTRACIONES DEL MEDIO DE REACTIVOS...