Creciendo bacterias en medios selectivos

INTRODUCCIÓN
En el campo de la bacteriología, para lograr el establecimiento, desarrollo y
posterior aislamiento de las bacterias en condiciones de laboratorio, se han
diseñado diversos medios nutritivos (mezcla de compuestos orgánicos e
inorgánicos que cumplen con los requerimientos indispensables para el desarrollo
de las bacterias). Para que un medio nutritivo sea adecuado debesatisfacer lo
siguiente: Fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno y factores de crecimiento.
Además también se requiere una adecuada temperatura, buen pH y una buena
esterilización.
Se le llama cultivo al crecimiento bacteriano en un medio nutritivo y dependiendo
del número de diferentes bacterias cultivadas en un mismo medio tendremos:
• Cultivo Axénico: Sólo un tipo de bacteria
• CultivoBimembre: Dos tipos de bacterias
• Cultivo Mixto: Varios tipos de bacterias
Uno de los problemas básicos en bacteriología es la imposibilidad de trabajar con
colonias puras ya que estas no se encuentran en la naturaleza. Por lo tanto se ha
tenido que desarrollar la manera de lograr el crecimiento de colonias puras del
organismo, por lo tanto se han diseñado medios nutritivos que inhiben elcrecimiento de ciertos grupos de bacterias y permiten el desarrollo de otros. A
estos medios se les llama medios selectivos.
En este trabajo se estudiarán las bacterias Vibrio spp, Proteus spp y Klebsiella spp
tratando de aislarlas utilizando medios selectivos (EMB (Eosin Methylene Blue),
MacConkey y TCBS agar (Tiosulfato citrato bilis sacarosa)).
Las especies del género Vibrio son bacilosGram negativos, dotados de una
flagelación monotrica o polar por lo tanto les permite una elevada movilidad.
Soportan los medios alcalinos y las concentraciones salinas. No forman esporas,
son oxidasa positiva y anaerobios facultativos. Es posible encontrarlas unidas en
sus orillas, por lo que forman agregados espirales o en forma de S.
Las especies del género Klebsiella son Gramnegativos y no poseen flagelos por
lo tanto carecen de motilidad. Son fijadoras de nitrógeno y son ubicuas en la
naturaleza. Posee una prominente capa de polisacáridos y son anaerobios
facultativos
Las especies del género Proteus son Gram negativos y algunas especies de este
género poseen flagelos que les permite tener motilidad. No forman esporas, son oxidasa negativa y anaerobios facultativos.Son ubicuas y residen en el tracto
intestinal del hombre y algunos animales.
Las bacterias son un grupo muy complejo y diverso pero estas no se pueden
identificar por sus caracteres morfo-anatómicos externos debido a su tamaño y a
su simplicidad estructural. Por lo tanto se utilizan criterios basados en aspectos
fisiológicos, metabólicos o ecológicos.
Estos mecanismos de identificaciónse siguen desarrollando y actualmente las
investigaciones se enfocan al análisis del genoma.
En este trabajo se realizarán pruebas bioquímicas para la identificación de cepas
bacterianas generando un patrón de biotipos según sea la capacidad de degradar
compuestos orgánicos y convertirlos en parte de su alimento.
En este trabajo se utilizaran ocho cajas petri con azucares (lactosa,sacarosa,
arabinosa, dulcitol, salicina, rafinosa y ramnosa). También se realizaran
experimentos con dieciséis tubos de ensayes con el medio TSI (Triple Sugar Iron).
Para dichos experimentos se tiene unas tablas de biotipos esperados.
Géneros
Probados
Lact. Saca. Arab. Ram. Dulci. Sali. Rafi. Citra.
Klebsiella Si Si Si Si Si Si Si Si
Proteus No Si No No No No No No
Tabla 1. Biotipos esperadosen medio mínimo de azúcar para los géneros a
estudiar. °
Géneros
Probados
Crecimiento Superficie Fondo Gas �!�
Klebsiella Bueno Amarillo Rojo Si No
Proteus Bueno Amarillo Amarillo Si Si
Tabla 2. Biotipos esperados en medio TSI para algunos géneros conocidos de
bacterias (Después de 30 hrs de incubación a 36 °C) °
METODOLOGÍA
Práctica No 2.Tincion de Gram
Para realizar la tinción de...