Criopreservacion del semen canino

DETERMINACIÓN DEL PROTOCOLO DE CRIOPRESERVACIÓN DE SEMEN CANINO: REPORTE PRELIMINAR

DETERMINATION OF THE PROTOCOL FOR THE CRIOPRESERVATION OF THE CANINE SEMEN: PRELIMINARY REPORT

Rafael Bohórquez1, 2, Aitor De Ondíz1, Roberto Palomares1 y Fanny Gallardo2
1Unidad de Reproducción Animal, Facultad de Ciencias Veterinarias de La Universidad del Zulia. E-mail: rbohorquez@luz.edu.ve. 2Unidadde Investigaciones Clínicas, Facultad de Ciencias Veterinarias de La Universidad del Zulia.

RESUMEN

Se recolectaron muestras de semen a 7 machos caninos de varias razas, a las cuales se les practicó un espermatograma completo. Aquellas muestras seminales clasificadas como óptimas fueron utilizadas para ser sometidas al proceso de criopreservación. Se procedió a congelar el semen utilizandodilutores en base a TRIS, ácido cítrico, glucosa, penicilina, estreptomicina, yema de huevo, agua destilada y glicerol. El semen fue congelado en vapores de nitrógeno líquido a 10 centímetros por encima de su nivel. El semen fue sometido a pruebas de evaluación considerándose los parámetros de volumen, color, pH, motilidad, concentración y morfología. Se realizaron pruebas de resistencia térmicaen placas calentadas para el semen fresco, diluido, glicerinado y descongelado, por períodos de tiempo de 15, 30, 45, 60 y 90 minutos, obteniéndose resultados de motilidad de hasta 30 % al cabo de 90 minutos. Se pudo observar la versatilidad y sencillez del uso de este dilutor y de la técnica de congelación en vapores de nitrógeno líquido para la criopreservación del semen canino.

PalabrasClaves: caninos, semen congelado, dilutor, TRIS, resistencia térmica.


ABSTRACT
Seven canine semen samples from various breeds were collected and evaluated by a full spermatogram. Those samples classified as optimal were used to follow the freezing protocol. A TRIS buffer solution containing citric acid, glucose, penicillin, streptomycin, egg yolk, distilled water and glycerol was used todilute and freeze the semen. The semen was frozen on liquid nitrogen vapors at 10 centimeters above the level of nitrogen. Semen volume, color, pH, motility, concentration and morphology was evaluated. Thermal resistance tests were conducted for fresh, diluted, chilled and post thawed samples of semen, been observed up to 30 % motility after 90 minutes. The essay probed the versatility and practicalityof the use of this dilutor, and the easiness of the technique of freezing semen with vapors of liquid nitrogen.

Key words: canine, frozen semen, dilutor, TRIS, thermal resistance.
INTRODUCCIÓN

La inseminación artificial en caninos ha tenido un auge en las últimas dos décadas especialmente en el área de semen criopreservado [2, 8, 9, 11], en la cual se han desarrollado diversosprotocolos de investigación para estudiar diferentes técnicas de congelación, y dilutores del material seminal. Actualmente la crisis económica que sufre nuestro país ha obligado a desarrollar técnicas novedosas, que suplanten esquemas de importación de tecnologías o productos elaborados, por la imposibilidad de costearse los mismos.
Las inseminaciones realizadas con semen congelado tienen una mayortasa de preñez cuando el material seminal es depositado intrauterinamente en comparación a la manera tradicional vaginal [2, 8, 9, 10, 11, 26]. La razón fundamental para que las tasas de preñez sean más bajas es debido a que el semen luego de la descongelación acorta su vida.
Se han probado muchos dilutores para realizar el proceso de congelación seminal, siendo uno de los componentes máscomunes el TRIS [2, 3, 8, 10, 11, 26]. A su vez se agregan porcentajes diferentes de glicerol, carbohidratos y otras sustancias para aumentar la vida del semen.
Este reporte preliminar muestra los resultados de las técnicas de criopreservación de semen canino utilizadas por primera vez en Venezuela, empleando insumos de fácil consecución en nuestro país, no importados a altos costos, y de una...