Cromatografia de Adsorcion

 INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL


ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS


MÉTODOS DE ANÁLISIS


SEPARACION DE UNA MEZCLA DE AZUL DE METILENO Y FLUORESCEINA USANDO CROMATOGRAFIA PORADSORCION


DE PAZ RUIZ AURA NEMALLI






INTRODUCCION
La adsorción es un fenómeno de superficie, por lo tanto físico, en el cual diversas sustancias son atrapadas en la superficie de unmaterial adsorbente, así pues, en la cromatografía de adsorción, se aprovecha esta propiedad del analito que queremos separar, dado que si es en una mezcla, cada componente de la mezcla se adsorbe condistinta fuerza, lo cual origina que el analito se retenga en la fase estacionaria, es decir, se adsorba, y los demás componentes se eliminen.
El grado de adsorción varía según la naturaleza ysuperficie específica de los adsorbentes y naturaleza de los solutos. Los enlaces entre moléculas adsorbidas y el adsorbente han de ser débiles para que su fijación sea reversible, las uniones son debidas afuerzas intermoleculares (interacciones dipolo-dipolo o puentes de hidrógeno). Como regla general, las polaridades del adsorbente y de los solutos han de ser opuestas
La retención se realiza en basea la competencia que se establece entre el soluto a separar y las moléculas de la fase móvil por adsorberse a los centros activos polares de la fase estacionaria. Así las moléculas de soluto seadsorben a los centros activos de la fase estacionaria y van siendo desplazados por las moléculas polares presentes en la fase móvil.
OBJETIVOS
Utilizar la cromatografía por adsorción para separar doscolorantes
Comprobar la separación por medio del perfil de elución
RESULTADOS
Tabla 1. Valores de absorbancia obtenidos para la separación de fluoresceína y azul de metileno
Tubo No
Volumen deElución (ml)
A493
A650
1
3
0.022
0.051
2
6
0.018
0.073
3
9
0.038
0.706
4
12
0.08
0.365
5
15
0.048
0.211
6
18
0.026
0.135
7
21
0.021
0.08
8
24
0.019
0.079
9
27
0.018...