Cromatografia De Exclusion Molecular

CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN POR TAMAÑO
La cromatografía de exclusión por tamaño, que también se ha denominado cromatografía de penetrabilidad sobre geles o de filtración sobre geles, es unatécnica muy valiosa que se aplica particularmente a especies de elevado peso molecular. Los rellenos para la cromatografía de exclusión por tamaño están constituidos por pequeñas partículas (10um)poliméricas o de sílice que contienen una red de poros uniforme en los que puede difundir las moléculas del soluto y del disolvente. Las moléculas del soluto y del disolvente. Las moléculas son atrapadaseficazmente en los poros y eliminadas del flujo de la fase móvil. El tiempo de residencia medio en los poros depende del tamaño efectivo de las moléculas de los analitos. Las moléculas que son más grandesque el tamaño medio de poro del relleno son excluidas y de esta forma, esencialmente no se retienen y, por tanto, son las primeras que son significativamente menores que los poros, pueden penetrar através del laberinto de poros y así resultan atrapadas durante más tiempo; éstas son las ultimas en eluir. Entre estos dos extremos, están las moléculas de tamaño intermedio cuya penetración media enlos poros depende de su diámetro. Dentro de este grupo, tienen lugar el fraccionamiento, que está directamente relacionado con el tamaño molecular y en cierto modo con la forma molecular. Obsérvese quelas separaciones por exclusión por tamaño difieren de los otros procedimientos que se han considerado, en que no implican una interacción química o física entre los analitos y la fase estacionaria.De hecho, se procura evitar este tipo de interacciones dado que originan una mala eficacia de la columna. Obsérvese también que a diferencia de otros tipos cromatografía, hay un límite superior para eltiempo de retención, ya que ningún analito es retenido más que aquel para el cual la penetración en la fase estacionaria es total.
RELLENOS DE COLUMNA.
En cromatografía de exclusión por...