Cromatografia hplc

HPLC PARA SUSTANCIAS QUIRALESCROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN QUIRAL INTRODUCCIÓNLa separación de enantiómeros mediante técnicas cromatográficas convencionales, es decir con adsorbentes yfases móviles no quirales, no es posible dado que en esas condiciones dos enantiómeros poseen las mismas propiedades de adsorción.¡UN MEDIO AQUIRAL NO DISTINGUE UN SUSTRATO QUIRAL!La separación deenantiómeros mediante técnicas cromatográficas puede efectuarse de tres formas:- Mediante la derivatización de la mezcla de enantiómeros con un reactivo quiral enantioméricamente puro, de manera que seobtiene una pareja de diastereoisómeros, los cuales pueden ser separados en columnas convencionales (los diastereoisómeros poseen en general diferentes propiedades físicas y químicas, sin necesidad deintermediación de un medio quiral, véase con mayor detalle en las lecciones paso a paso).- Mediante el empleo de fases móviles que contengan algún aditivo quiral.- Mediante el empleo de fasesestacionarias quirales (columnas quirales para HPLC y Cromatografía de Gases). FASES ESTACIONARIAS QUIRALES PARA HPLCDe entre las técnicas descritas, el empleo de Fases Estacionarias Quirales (Columnas quiralespara HPLC Y Cromatografía de gases) es la más empleada para la resolución de enantiómeros. Existen en el mercado una gran variedad de fases estacionarias quirales, las cuales se pueden clasificar en:-Fases de intercambio de ligando quirales: La técnica de cromatografía de intercambio de ligando quiral se basa en la unión covalente de un ligando ópticamente activo (generalmente un aminoácido) a unsoporte sólido. La separación de los enantiómeros presentes en la muestra eluida se lleva cabo por su diferente capacidad para desplazar a dicho ligando en reacciones de complejación con ionesmetálicos.Por ejemplo, en el esquema 1 se muestra una fase estacionaria de L-prolina unida a sílice, después de haber cargado una disolución que contiene iones Cu2+. Como puede verse, los iones Cu2+...