Cromatografía en papel y capa fina (TLC)
Páginas: 3 (725 palabras)
Publicado: 20 de enero de 2014
EBT.07. CROMATOGRAFÍA EN PAPEL Y CAPA FINA (TLC)
9 Y 16/01/2014
Fundamento teórico
La cromatografía en capa fina (en inglés thin layer chromatography o TLC) es una técnica analítica rápida ysencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica. Entre otras cosas permite:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por ejemplo, la efectividad de unaetapa de purificación.
- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
- Realizar elseguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuando la reacción ha acabado.
La muestra aanalizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en unacubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un repartodiferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
La cromatografía en papel, únicamente se diferencia de la TLC en que su fase estacionaria está constituidasimplemente por una tira de papel filtro.
Identificación de la muestra:
Aminoácidos al 5%: L-prolina, Serina-L, Arginina, Treonina y L-alanina.
Fase móvil:
Papel: 200ml de butanol: Ácido acéticoglacial: H2O (4:1:3)
TLC: 30ml NH4OH 30% + 70ml etanol
Fundamento práctico:
Preparar las fases móviles para cromatografía en papel y TLC.
Preparar los aminoácidos:
Papel: Cada grupo prepara unanimoácido.
L-prolina al 0,5% Pmol: 115,13 g/mol y enrasar a 50ml con H2O
TLC: 5g de L-prolina + 5ml propanol + enrasar con H2O a 50ml
Preparamos las fases estacionarias dibujando una línea con...
9 Y 16/01/2014
Fundamento teórico
La cromatografía en capa fina (en inglés thin layer chromatography o TLC) es una técnica analítica rápida ysencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica. Entre otras cosas permite:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por ejemplo, la efectividad de unaetapa de purificación.
- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
- Realizar elseguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuando la reacción ha acabado.
La muestra aanalizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en unacubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un repartodiferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
La cromatografía en papel, únicamente se diferencia de la TLC en que su fase estacionaria está constituidasimplemente por una tira de papel filtro.
Identificación de la muestra:
Aminoácidos al 5%: L-prolina, Serina-L, Arginina, Treonina y L-alanina.
Fase móvil:
Papel: 200ml de butanol: Ácido acéticoglacial: H2O (4:1:3)
TLC: 30ml NH4OH 30% + 70ml etanol
Fundamento práctico:
Preparar las fases móviles para cromatografía en papel y TLC.
Preparar los aminoácidos:
Papel: Cada grupo prepara unanimoácido.
L-prolina al 0,5% Pmol: 115,13 g/mol y enrasar a 50ml con H2O
TLC: 5g de L-prolina + 5ml propanol + enrasar con H2O a 50ml
Preparamos las fases estacionarias dibujando una línea con...
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