Cromatografia En Capa Fina Y C. Sobre Papel

CAPITULO3: CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA Y C. SOBRE PAPEL

1) ASPECTOS TEORICOS:
En la cromatografía sobre papel y en la cromatografía en capa fina la fase estacionaria no se dispone en forma decolumna, sino que está constituida, en el primer caso, por una hoja de papel de filtro, y en el segundo, por una capa de absorbente finamente dividido extendida sobre una placa de vidrio o deplástico. El sustrato a analizar se coloca cerca del borde del papel o de la superficie absorbente en forma de una pequeña mancha circular, obtenida aplicando una frota de la solución de la muestra ydejándola secar. Luego, se sumerge este borde de papel o de la placa en el disolvente <<revelador>> o <<de desarrollo>> que constituye la fase móvil. El disolvente asciende por el papelo la placa por capilaridad, arrastrando consigo el sustrato. Antes de que alcance el extremo superior del papel o la placa, se detiene el flujo de disolvente retirando el papel o la placa de lacámara de desarrollo y se marca un lápiz la posición alcanzada por el frente del disolvente. Normalmente, el sustrato no se ha desplazado a la misma velocidad que el disolvente, sino que ha quedadoretrasado, tanto más cuanto más fuertemente era retenido por el papel o el absorbente sólido. Se señala también la posición de la mancha de sustrato. Si esta mancha es coloreada su localización es inmediata;si es incolora, debe hacerse visible tanto por métodos físicos, como la fluorescencia (emisión de radiación visible al absorber rayos ultravioleta o UV) y la radiactividad (cuando se trabaja concompuestos marcados por isotopos radiactivos) o por métodos químicos, en el cual se utiliza un reactivo químico (revelador) que reacciona con la sustancia dando productos coloreados o fluorescentes(visibles a la luz ordinaria o UV), ejemplos de revelador puede ser solución de Ninhidrina (para aminoácidos) o yodo.
CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
La cromatografía en capa fina (c.c.f. o t.l.c. = Thin...