curva de precipitación en capilar

Curva de precipitación cuantitativa en capilar

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Material
12 tubos capilares de 100 x 1.6 mm
10 tubos de ensayo de 12 x 75 mm
2 tubos de ensayo de 13 x 100 mm
3 pipetas de 1 mL(1/10)
1 gradilla para tubos de ensayo
1 gradilla de plastilina para capilares
Papel absorbente
Marcador indeleble

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Reactivos
1 mL de solución de antígeno de concentración conocida
0.6 mL deanticuerpo específico
5 mL de solución salina isotónica (SSI) o PBS

Metodología
1. Marcar los capilares a 3 y 6 cm a partir de un extremo, con un marcador.
2. En los tubos de ensayo debidamente rotulados (2a 10), realizar diluciones seriadas
(2X) de la solución de antígeno con SSI: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256 y
1:512. Para ello:
o Colocar 0.5 mL de SSI en cada uno de los tubos
o Altubo 2 agregar 0.5 mL de la solución de antígeno concentrada, mezclar con
la misma pipeta (dilución 1:2)
o Pasar 0.5 mL del tubo 2 al tubo 3. Mezclar. (Dilución 1:4)
o Repetir el procedimiento hasta eltubo 10 (diluciones 1:8 a 1:512)
3. Tomar un tubo capilar y absorber por capilaridad un volumen de anti-suero hasta llegar
a la primera marca del tubo capilar (3 cm), y manteniendo el dedo índice en elextremo
del capilar, limpiar la parte externa con papel absorbente.
4. Quitando el dedo índice del extremo, permitir que ascienda por capilaridad la solución
de antígeno sin diluir (1:1) de talmanera que el volumen total llegue hasta la segunda
marca del capilar. Limpiar nuevamente la parte externa del capilar con papel
absorbente.
5. Tapando con el dedo índice y pulgar los extremos del capilar,mezclar las soluciones
por inversiones repetidas o moviendo el líquido de un lado al otro y rotando el capilar
simultáneamente varias veces.

6. Con el dedo índice tapar uno de los extremos delcapilar y centrar el líquido dentro del
capilar, colocando el dedo índice en un extremo.
7. Insertar el capilar verticalmente en la gradilla de plastilina, dejando unos mm con aire
entre la mezcla y la...