DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CATALASA.
La catalasa es una enzima de naturaleza compleja, que se halla distribuida en numerosos tejidos, y es particularmenteabundante en los eritrocitos.
Es una de las enzimas más activas que existen en el organismo. La función que realiza la catalasa es muy importante, protege a las células de la peroxidación, es decir,destruye el peróxido de hidrogeno que se forma en las células, con motivo de varias reacción de oxidación.
La reacción que cataliza la enzima es la siguiente:
2 H2O2 2 H2O + O2
Es decir, la enzimatransforma 2 moléculas de peróxido de hidrogeno (H2O2), el cual es tóxico y caustico para la célula, hasta 2 moléculas de agua (H2O), u una de oxigeno molecular (O2). Un mg de enzima pura libera cercade 3,000 litros de oxigeno por hora.
Objetivo: El alumno observara y demostrara la actividad de la catalasa presente en los eritrocitos, observara a la vez el efecto que tiene sobre la acciónenzimática la adición de substancias inhibidoras, y la desnaturalización enzimática por la acción de calor.
MATERIALES REACTIVOS
1 gradilla
6 tubos de ensayo grandes
Peróxido de hidrogeno al 15%
2pipetas de 5 ml
Cianuro de sodio al 8%
1 mechero
Nitrato de plomo 5%
1 tripie
1 tela asbesto
2 vasos p.p 250 ml
MATERIAL BIOLOGICO
1 pinza p/tubo de ensayo
1 termómetro
Sangre diluida1:50
2 pipetas 1 ml
2 frascos goteros
Metodología:
1. Se toman 4 tubos de ensayo y los numeramos.
2. Al tubo rotulado como No. 1 se añade 3 ml de sangre diluida, y se coloca en bañoMaría durante 10 minutos, enfriar luego con agua corriente hasta que alcance la temperatura ambiente.
3. Se procede colocando los reactivos en los correspondientes tubos.
TUBO 1
TUBO 2
TUBO 3
TUBO4
Peróxido de hidrogeno
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
Cianuro de sodio
6 gotas
Nitrato de plomo
6 gotas
4. Se colocan los tubos otra vez en baño María a 37 grados centígrados durante 5...
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