Derivatización De Ácidos Grasos

Los ácidos grasos saturados e insaturados de C a través de C22
Se han analizado. Los ácidos grasos son los componentes principales de los aceites y grasas y forman un patrón distintivo en cada deestos compuestos. Por ejemplo, la mantequilla y la margarina se pueden diferenciar por el porcentaje de ácido butírico en los triglicéridos. Para determinar el patrón de ácidos grasos de una grasa oaceite, ácidos grasos libres primero se obtienen a través de hidrólisis.
La derivatización se realiza a continuación para introducir un cromóforo, que permite el análisis de los ácidos grasos utilizandoHPLC y detección UV-visible.
Preparación de la muestra
Los triglicéridos se hidrolizan utilizando metanol caliente y KOH, seguido de derivatización.
Condiciones cromatográficas
El método de HPLCque aquí se presenta se utilizó en el análisis del patrón de ácidos grasos de la grasa dietética. El método implica hidrólisis con KOH caliente / metanol y derivatización en línea con bromuro debromofenacilo.
Preparación de la muestra 0,215 g de grasa se hidrolizó con 500 l MeOH / KOH a 80 º C durante 40 min en un termomezclador. Después de enfriar 1,5 ml ACN / THF (1:1) se añadió, y se agitóla mezcla fue durante 5 min. La mezcla se filtró luego a través de un RNML 0,45-m Minisart desde Satorius.

Columna 200 x 2,1 mm, MOS, 5 micras
Fase móvil A = agua (70%)
B = (ACN + 1% THF) (30%)Degradado en B min 5 30% en B min 15 70% en B min 17 70% en B min 25 98%
Velocidad de flujo 0,3 ml / min
Columna compartimiento 50 ° C
Detector de longitud de onda variable, 258 nm
Laderivatización 60 mg / ml bromofenacilo
Se disolvió bromuro en ACN.
Inyector de programa para la derivatización en línea
1. Dibuja 2,0 l del vial 2 (ACN)
2. Dibuja 1,0 l de aire
3. Dibuja 1,0 l de vial 3(derivatización
agente)
4. Dibuja 0,0 l del vial 4 (frasco lavador)
(ACN / THF, 50:50)
5. Dibujar 1,0 l de la muestra
6. Dibuja 0,0 l del vial 4 (frasco lavador)
7. Dibuja 1,0 l de vial 3...