Determinación De Hidratos De Carbono

Objetivos: Identificar y cuantificar hidratos de carbono en distintas muestras incógnitas empleando los métodos de Somogyi-Nelson y Roe.


PARTE A:

Método de Somogyi Nelson: Cuantificación deglúcidos reductores.

Testigo: Glucosa 2,5 mM.

Sensibilidad: 0,1 – 0,3 moles de glucosa.

Incógnitas sin hidrolizar:
Incógnita Abs530 Abs530 - blanco moles
X1 0,880 0,716 0,178
X2 0,6090,435 0,101
X3 0,163 0 0
X4 0,988 0,814 0,204
X5 0,167 0 0

Incógnitas hidrolizadas:
Incógnita Abs530 Abs530 - blanco moles
X1 0,731 0,557 0,134
X2 0,599 0,425 0,098
X3 0,1 0 0
X4 1,1250,951 0,242
X5 1,659 1,485 0,388


PARTE B:

Método de Roe: Cuantificación de cetosas.

Testigo: Sacarosa 5mM.

Sensibilidad: 0,05 – 0,30 moles de sacarosa.

Resultados:

molesl l H20 Abs530 Abs530 - blanco
0,05 10 390 0,102 0,054
0,1 20 380 0,136 0,088
0,15 30 370 0,154 0,106
0,20 40 360 0,190 0,142
0,25 50 350 0,207 0,159
0,30 60 340 0,248 0,200
X1 40 360 0,0580,010
X2 40 360 0,127 0,079
X3 40 360 0,060 0,012
X4 40 360 0,130 0,082
X5 40 360 0,142 0,094
Blanco - 400 0,048 -











Utilizando la ecuación anterior y teniendo en cuenta quetomamos una alícuota de 40 L, obtenemos los mg de proteína de las incógnitas:


Incógnita moles Concentración (mM)
X1 - -
X2 0,093 2,325
X3 - -
X4 0,099 2,462
X5 0,112 2,999X1 y X3 no caen dentro del rango de linealidad.


CONCLUSIONES:

X1 = Galactosa
X2 = Fructosa
X3 = Manitol
X4 = Miel
X5 = Sacarosa

De acuerdo al método de Roe, podemos concluir que lasincógnitas 1 y 3 no son cetosas, porque los moles calculados no caen dentro del rango de sensibilidad. Por el método de Somogyi Nelson podemos caracterizar estos compuestos: la incógnita 3 esManitol, un alcohol que al no ser reductor y no ser cetosa, da negativo en ambos ensayos y la incógnita 1 es el monosacárido Galactosa que da positivo en éste último método porque posee un extremo...