Determinación De Hierro Serico

1.- FUNDAMENTO

El hierro se disocia del complejo sérico hierro-Transferrina en medio ácido. EL hierro libre se reduce a ión ferrroso mediante el ácido ascórbico, los iones ferrosos en presencia deFerrroZine ® forman un complejo coloreado

• Transferrina (Fe 3+) + e- -----------------------> 2 Fe 2+ + Transferrina
• Fe 2+ ------------------> Complejo coloreado


2.- MATERIALNECESARIO. MUESTRAS

2.1.- Material
• Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 562nm
• Cubetas de 1 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio

2.2.- Muestras
• Suero o plasmaheparinizado
• Libre de hemolisis. Separado lo antes posible de los hematíes. Es hierro es estable 7 días a 2-8 ºC


3.- REACTIVOS. PREPARACION

3.1.- Reactivos

R1 Acetato pH 4,9 100 mmol /lR2 Ácido ascórbico 99,7 %
R3 Ferrozine 40 mmol /l
Iron Cal Patrón primario acuoso hierro 100 micgr/dl

3.2.- Preparación
• Reactivo de trabajo (RT):
o Disolver el contenido de un tubo de R2
•Reductor en un frasco de R1 Tampón
o Disolver una dosis (medir usando la cuchara que se incluye) de R2 Reductor en un frasco de R1 Tampón
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver sucontenido. Estabilidad de 3 meses a 2-8ºC o 1 mes a temperatura ambiente




IES “Renacimiento”
Ciclo Formativo Grado Superior Objetivos:
• Hierro
(Ferrozine – colorimétrico)

Modulo VFundamentos y Técnicas de Análisis Hematológicos y Citológicos


4.- PROCEDIMIENTO

• Condiciones de ensayo:
o Longitud de onda ……………………… 562 nm (530-590)
o Cubeta …………………………………… 1 cm paso de luzo Tempertatura …………………………… 15 -25ºC
• Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada
• Pipetear


Blanco RT Patrón Blanco Muestra Muestra
RT (ml) 1 1 1 1
R3 (gotas) 1 1 ----- 1A. Destilada (µlitros) 200 ------ ----- -----
Patrón (µlitros) ------- 200 ----- -----
Muestra (µlitros) ------- 200 200

• Mezclar e incubar 5 minutos a 37 grados o 10 minutos a temperatura...