Determinación De Vibrio Cholerae En Alimentos
Páginas: 10 (2335 palabras)
Publicado: 19 de febrero de 2013
Practica No. 10
Determinación de Vibrio cholerae en alimentos
Objetivo.
Desarrollar los métodos utilizados para la determinación de Vibrio cholerae en alimentos.
Introducción.
El género Vibrio Pacini 1854 está formado por bacilos Gram negativos curvados o rectos, cortos, no esporulados, aeróbicos o anaerobios facultativos. Los diferentes miembros del género, que normalmenteson móviles por la presencia de un único flagelo polar, crecen en concentraciones bastante altas de sales biliares, haciéndolo también en medios alcalinos.
Este género está clasificado en la familia Vibrionacea junto con Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium y Lucibacterium (Buchanan y Gibbons, 1974). Es importante diferenciar al género Vibrio de estos géneros, ya que aparece en la literaturainformación implicando a los géneros Aeromonas y Plesiomonas como causantes de infecciones alimentarias (Bryan,1975). En la Tabla 25 se relacionan las características del género Vibrio y de los géneros con él relacionados. La especie Vibrio cholerae se caracteriza por las reacciones que se detallan en la Tabla 26.
Vibrio cholerae tiene dos biotipos, denominados Clásico y el Tor, que sediferencian basándose en el carácter hemolítico y en otras propiedades, como se indica en la Tabla 27. Ambos tipos, el Clásico y el Tor, aglutinan con el suero polivalente para V. cholerae y con uno u otro de los antisueros monoespecíficos Ogawa e Inaba. El serogrupo Hikojima aglutina con ambos antisueros, el Ogawa y el Inaba.
Un grupo bioquímicamente relacionado, pero serológicamente diferente, esel conocido como vibrios no aglutinables (NAG) o vibrios no-cólera. Este grupo no aglutina ni con el antisuero V. cholerae ni con el Ogawa ni con el Inaba. El Comité‚ Internacional para la Nomenclatura de Bacterias incluye los vibrios no aglutinables en la especie V. cholerae y reconoce 139 grupos antigénicos 0 (Sakazaki y col., 1970; Hugh y Feeley, 1972). Ambos biotipos (V. cholerae y vibriosno aglutinables) poseen un antígeno H idéntico. Hay varios subgrupos 0 para los vibrios no aglutinantes, denominados I, II, III, IV, etc.
En razón de que la duración de la eliminación de V. cholerae es relativamente corta, las muestras fecales deben ser recolectadas, tan pronto como sea posible. Es mejor recolectar las muestras de deyecciones durante la fase de diarrea líquida. Las muestrasde alimentos deben recogerse también tan pronto como sea posible y refrigerarse entre 4 y 10ºC, pero nunca congelarse.
Vibrio cholerae no sobrevive más de unas pocas horas en deyecciones mantenidas a temperaturas tropicales. Dichas muestras deberàn, por tanto,. ser enfriadas y mantenidas a 4 ºC ó menos, o bien ser colocadas en medios de mantenimiento. Los medios de transporte y mantenimientoque han dado resultados adecuados son el medio sal marina de Venkatraman y Ramakrishnan (Venkatraman y Ramakrishnan, 1941), el medio de Cary Blair (S. G. Cary y Blair, 1964), el agar taurocolato tripticasa telurito gelatina (Monsur, 1963), el agua de peptona alcalina y el papel secante (Barua y Gómez, 1967). La solución salina con glicerol tamponada no es adecuada para el transporte de V.cholerae (DeWitt y col., 1971).
Vibrio cholerae puede crecer en diversos medios habituales de laboratorio. La siembra directa en placa de las muestras a menudo conduce inmediatamente al aislamiento de V. cholerae, pero para el aislamiento de este microorganismo a partir de muestras recolectadas ya avanzado el curso de la enfermedad, a partir de portadores o después de la administración de sustanciasantimicrobianas, se recomienda el enriquecimiento previo.
En la práctica cotidiana, al agua de peptona alcalina se recomienda como medio de enriquecimiento para el aislamiento de estos microorganismos a partir de los alimentos. Este enriquecimiento es necesario debido a que el número de vibrios en las muestras de alimentos es generalmente pequeño comparado con el de otros contaminantes. El...
Determinación de Vibrio cholerae en alimentos
Objetivo.
Desarrollar los métodos utilizados para la determinación de Vibrio cholerae en alimentos.
Introducción.
El género Vibrio Pacini 1854 está formado por bacilos Gram negativos curvados o rectos, cortos, no esporulados, aeróbicos o anaerobios facultativos. Los diferentes miembros del género, que normalmenteson móviles por la presencia de un único flagelo polar, crecen en concentraciones bastante altas de sales biliares, haciéndolo también en medios alcalinos.
Este género está clasificado en la familia Vibrionacea junto con Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium y Lucibacterium (Buchanan y Gibbons, 1974). Es importante diferenciar al género Vibrio de estos géneros, ya que aparece en la literaturainformación implicando a los géneros Aeromonas y Plesiomonas como causantes de infecciones alimentarias (Bryan,1975). En la Tabla 25 se relacionan las características del género Vibrio y de los géneros con él relacionados. La especie Vibrio cholerae se caracteriza por las reacciones que se detallan en la Tabla 26.
Vibrio cholerae tiene dos biotipos, denominados Clásico y el Tor, que sediferencian basándose en el carácter hemolítico y en otras propiedades, como se indica en la Tabla 27. Ambos tipos, el Clásico y el Tor, aglutinan con el suero polivalente para V. cholerae y con uno u otro de los antisueros monoespecíficos Ogawa e Inaba. El serogrupo Hikojima aglutina con ambos antisueros, el Ogawa y el Inaba.
Un grupo bioquímicamente relacionado, pero serológicamente diferente, esel conocido como vibrios no aglutinables (NAG) o vibrios no-cólera. Este grupo no aglutina ni con el antisuero V. cholerae ni con el Ogawa ni con el Inaba. El Comité‚ Internacional para la Nomenclatura de Bacterias incluye los vibrios no aglutinables en la especie V. cholerae y reconoce 139 grupos antigénicos 0 (Sakazaki y col., 1970; Hugh y Feeley, 1972). Ambos biotipos (V. cholerae y vibriosno aglutinables) poseen un antígeno H idéntico. Hay varios subgrupos 0 para los vibrios no aglutinantes, denominados I, II, III, IV, etc.
En razón de que la duración de la eliminación de V. cholerae es relativamente corta, las muestras fecales deben ser recolectadas, tan pronto como sea posible. Es mejor recolectar las muestras de deyecciones durante la fase de diarrea líquida. Las muestrasde alimentos deben recogerse también tan pronto como sea posible y refrigerarse entre 4 y 10ºC, pero nunca congelarse.
Vibrio cholerae no sobrevive más de unas pocas horas en deyecciones mantenidas a temperaturas tropicales. Dichas muestras deberàn, por tanto,. ser enfriadas y mantenidas a 4 ºC ó menos, o bien ser colocadas en medios de mantenimiento. Los medios de transporte y mantenimientoque han dado resultados adecuados son el medio sal marina de Venkatraman y Ramakrishnan (Venkatraman y Ramakrishnan, 1941), el medio de Cary Blair (S. G. Cary y Blair, 1964), el agar taurocolato tripticasa telurito gelatina (Monsur, 1963), el agua de peptona alcalina y el papel secante (Barua y Gómez, 1967). La solución salina con glicerol tamponada no es adecuada para el transporte de V.cholerae (DeWitt y col., 1971).
Vibrio cholerae puede crecer en diversos medios habituales de laboratorio. La siembra directa en placa de las muestras a menudo conduce inmediatamente al aislamiento de V. cholerae, pero para el aislamiento de este microorganismo a partir de muestras recolectadas ya avanzado el curso de la enfermedad, a partir de portadores o después de la administración de sustanciasantimicrobianas, se recomienda el enriquecimiento previo.
En la práctica cotidiana, al agua de peptona alcalina se recomienda como medio de enriquecimiento para el aislamiento de estos microorganismos a partir de los alimentos. Este enriquecimiento es necesario debido a que el número de vibrios en las muestras de alimentos es generalmente pequeño comparado con el de otros contaminantes. El...
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