Determinación de vmax y km usando los 3 tipos de linearización

Ingeniería Bioquímica
Sexto Semestre
Grupo “B”
Materia: Cinética química y biológica

Tema: Cinética Enzimática

Alumna: Paulina Padilla Maldonado

12-04-11Morelia, Mich.

Determinar los valores de km y Vmax utilizando los 3 métodos de linearización para una enzima que cataliza una reacción dada, para la que se obtuvieron los siguientes datos:[S] | V₀ | 1/[S] | 1/V₀ | [S]/V₀ | V₀/[S] |
0.00000833 | 13.8 | 120048.02 | 0.0725 | 6.03623E-07 | 1656662.67 |
0.00001 | 16 | 100000 | 0.0625 | 0.000000625 | 1600000 |
0.0000125 | 19 | 80000 |0.05263 | 6.57895E-07 | 1520000 |
0.0000167 | 23.6 | 59880.24 | 0.04237 | 7.07627E-07 | 1413173.65 |
0.00002 | 26.7 | 50000 | 0.03745 | 7.49064E-07 | 1335000 |
0.000025 | 30.8 | 40000 | 0.03247 |8.11688E-07 | 1232000 |
0.0000333 | 36.3 | 30030.03 | 0.0275 | 9.17355E-07 | 1090090.09 |
0.00004 | 40 | 25000 | 0.025 | 0.000001 | 1000000 |
0.00005 | 44.4 | 20000 | 0.0225 | 1.12613E-06 |888000 |
0.00006 | 48 | 16666.67 | 0.0208 | 0.00000125 | 800000 |
0.00008 | 53.4 | 12500 | 0.0187 | 1.49813E-06 | 667500 |
0.0001 | 57.1 | 10000 | 0.0175 | 1.75131E-06 | 571000 |
0.0002 | 66.7 |5000 | 0.0150 | 2.9985E-06 | 333500 |

V₀ vs. [S]

Método de Lineweaver-Burk
1V₀= kmVmax 1[S] + 1Vmax
y = 5E-07x + 0.0125
m= 5E-07
1Vmax= 0.0125 Vmax = 1/0.0125 = 80 nM/L*min
Km= (m)(Vmax) = (5E-07) (80) = 4E-05

Método Hanes
[S]Vmax= 1Vmax [s] + kmVmax
y = 0.0125x + 5E-07
m= 0.0125
1Vmax = 0.0125
Vmax= 1/(0.0125) = 80 nM/L*min
kmVmax= 5E-07 km= (80)( 5E-07 )= 4E-05Método Eddie-Hosftees
Vo = -km Vo[S] + Vmax
y = -4E-05x + 80.004
m= -4E-05
-km = -4E-05 km= 4E-05
Vmax= 80.004 nM/L*min

Determinar si el rango de datos es el adecuado
km*[S] minima |4.80 |
km*[S] maxima | 0.20 |

El rango de concentración en comparación con la km se ve que no entra entre 0.1 y 10 el inferior sí, pero el superior está muy lejos por lo que el rango no es el...