determinacion de concentracxion de calcio

Ruby N. Gutiérrez
5.1
Lab N°1 – tinciones simples y compuestas
- Tinciones
o Simples
 1 sólo tinte
 Morfología
 Violeta cristal; Azul de metileno o Carbol fucsina
o Compuestas
 2 ó más reactivos o tintes
 Clasificar bacterias según características especiales.

- Bacterias (morfología)
o Individual
 Cocos
 Bacilos
 Espiroquetas
 Espirilos

o  Agrupación  Racimos (Staphylos)
  Cadenas (streptos)
  Pares (diplococos)
  Tétradas

 Cocobacilo = bacilo que
tiende a ser esférico
- Tinción de Gram: (+) = Púrpura x el violeta cristal; (-) = Rojo
o Extender, secar y fijar con calor
o Violeta cristal (tiñe las bacterias)
o Yodo de Gram (fija la tinción en gram positivas)
o Alcohol acetona (decolora en gram negativas)
o Safranina (colorante de contraste)- Tinción de Moeller (esporas): esporas tiñen de rojo, bacilos de celeste  Bacillus subtilis
o Carbol fuchina  mechero (esperar vapores, no hervir!!) =permite q entre el colorante
o Enjuagar
o Ácido sulfúrico 1%
o Enjuagar
o Azul de metileno
o Secar
- Tinción de Anthony (cápsula): Tinción negativa: lo q queremos ver no se tiñe, se tiñe el medio Klebsiella pneumoniae; Bacillus anthracis
o Leche descremada al 20%
o Frotis  secar al aire
o Violeta cristal 1%
o Lavar con sulfato de cobre  secar
o Observar principalmente los bordes



Lab N° 2 – Cultivo de bacterias y morfología colonial
- Clasificación de los medios según características físicas:
o Líquidos (caldos)
o Sólidos
 Tubos
 Inclinado (en pico de flauta)
 Profundo e inclinado (aguja)
Platos Petri  método de estrías = + utilizado para aislar colonias
o Semisólidos: para obtener motilidad  inocular con aguja
 Si se observa turbiedad = la bacteria posee movimiento
 En forma de aguja = la bacteria no se mueve (vertical)
- Según características químicas (depende de la composición de los medios de cultivo)
oNutritivos: para bacterias poco exigentes; posee lo mínimo que necesita una bacteria para
crecer.
 BHI (Brain Heart Infusion)
o Enriquecidos: medio nutritivo + nutriente específico
 Agar sangre
 Agar chocolate (sangre hervida)

 Thayer Martin = Agar chocolate + antibióticos  suprime bacterias que no queremos
q crezcan
o Diferenciales
 MacConkey
 EMB
o Selectivos
 Thayer Martin (Neisseria gonnorrohoeae)
MacConkey: contiene violeta cristal y rojo neutro (indicador de cuando cambia el pH)
 Gram (-)

- Características a evaluar en las colonias
o Tamaño
o Forma
o Borde

o  Elevación
o  Consistencia
o  Color

Resultados
- MacConkey: Klebsiella pneumoniae (+)
- Agar sangre: Staphylococcus aureus  B hemólisis
- Agar nutritivo: Bacillus subtilis
- Agar inclinado: Staphylococcus aureus y Escherichia coli
- Agar profundo: Klebsiella pneumoniae
-Caldos: Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniae  líquido más turbio
- Semisólido: Escherichia coli  se mueve
El conteo de colonias es importante para conocer la velocidad de reproducción de la bacteria y gracias a
esto elegir así el antibiótico adecuado para su tratamiento



LAB N°3 – EFECTO DE LOS AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS SOBRE
LAS BACTERIAS
-Muerte o destrucción de los microorganismos = pérdida de la capacidad de multiplicarse en
conjunto de condiciones conocidas
- Ausencia de crecimiento no es igual a esterilidad
- Esterilidad: destrucción de todas las formas vivientes
- Pasteurización: utilización del calor para matar las formas vegetativas de las bacterias
- Desinfección: empleo de agentes químicos (superficies)
- Antiséptico: sobre tejidos vivos (cuerpo)
-Asepsia: evita q lleguen a un ambiente protegido
- Antibiótico: natural
- Antimicrobiano: artificial
- Métodos físicos (agentes externos)
o Calor húmedo (autoclave  Parámetros: 15 lbs, 15 min, 121°C) = desnaturalización rápida
de las proteínas
o Calor seco (horno)
o Filtración
o Rayos UV  exposición directa: daño directo al ADN formando dímeros de timina; pérdida...