Determinacion De La Enzima Succinato Deshidrogenasa

¿COMO SE PUEDE DETERMINAR LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA SUCCINATO DESHIDROGENOSA EN PRESENCIA DEL
FENOL?

FUNDAMENTOS
Prácticamente todas las reacciones químicas que tienen lugar en los seres vivos están catalizadas por enzimas. Los enzimas son
catalizadores específicos: cada enzima cataliza un solo tipo de reacción, y casi siempre actúa sobre un único sustrato o sobre un grupo
muy reducido de ellos.En una reacción catalizada por un enzima la sustancia sobre la que actúa el enzima se llama sustrato.
El sustrato se une a una región concreta de la enzima, llamada centro activo. El centro activo comprende un sitio de unión formado por los
aminoácidos que están en contacto directo con el sustrato y un sitio catalítico, formado por los aminoácidos directamente implicados en el
mecanismo de lareacción. Una vez formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de reacción
Tipos de enzimas

Procedimientos y Resultados

Lavar y secar
Transferir
Preparar
Observar
los
yel
a limpiar
partes
higado
tubos
material
iguales
segun
al mortero
laentab
lo
Preparar
baño maria

Objetivos

Observar la actividad de la enzima
Succinato Deshidrogenasa
•Conocer el efecto del fenol en la actividadde la enzima Succinato Deshidrogenasa.
•

Material:

La velocidad en la actividad enzimática se ve afectada por cambios en :
•la temperatura: Un aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reacción hasta cierta temperatura óptima, ya que
después de aproximadamente 450 C se comienza a producir la desnaturalización térmica.
•pH: A pH alto o bajo se puede producir ladesnaturalización de la enzima y en consecuencia su inactivación.
•concentración del sustrato: Al principio un aumento de la concentración de substrato produce un aumento rápido de la velocidad de
reacción, pero si se sigue aumentando la concentración de substrato, la velocidad de reacción comienza a disminuir y a muy altas
concentraciones de substrato se observa que no cambia la velocidad de reacción, se diceque los centros activos de la enzima se
encuentran saturados.
La enzima succinato deshidrogenasa es una oxidorreductasa, forma parte de una serie de reacciones químicas que se llevan a cabo
dentro del ciclo de Krebs y tiene como función la reorganización de moléculas a cuatro átomos de carbono hasta la regeneración del
oxalacetato.
La succinato Deshidrogenasa cataliza la deshidrogenacionestereospecifica de succinato a fumarato.

La succinato deshidrogenasa contiene un grupo prostetico FAD que se une en forma covalente a la enzima; en general el FAD funciona
para oxidar bioquímicamente alcanos (como succinato) a alquenos (como fumarato). La deshidrogenacion del succinato produce FADH2
que debe reoxidarse antes que la succinato deshidrogenasa pueda emprender otro ciclo catalítico. Lareoxidacion de FADH2 se produce
cuando sus electrones se pasan a la cadena transportadora de electrones. La succinato deshidrogenasa es la única enzima del ciclo del
acido cítrico unida a la membrana.

Benemerita Universidad Autonoma De Puebla
Facultad de ciencias quimicas
Laboratorio de bioquimica ll
MC. Leticia Garcia Albarran
INTEGRANTES: Herrera Martinez, Cecilia Montserrat

Balanza granataria.
2tubos de ensaye
2 pipetas de 5ml
Baño María
Parrilla
Termómetro
½ placa Petri
Bisturi
Perilla
Pinzas para tubo de
ensaye

Reactivos:

NaOH al 10%
Acido succinico al 3%
neutralizado con NaOH al 10%
hasta pH=7.4
Fenol al 90%
Azul de metileno al 0.1%
Aceite mineral
Higado de rata
Agua destilada

Registro de datos y discusión
Tubo No 1 al agregar el fenol, el hígado comenzó a tener un cambio decoloración, mostrándose
verde-grisaseo, al adicionar el azul de metileno, se observaba gris-azulado. Después de la
incubación no se presencio un cambio significativo en el contenido del tubo.
Tubo No 2 Cabe resaltar que a este tubo no se le añadió fenol; al agregar el azul de metileno el
contenido en el tubo era azul. Durante la incubación y al finalizar ésta, el contenido del tubo
mostro coloración...