determinacion de proteinas

INTRODUCCIÓN
Las proteínas ocupan un lugar de máxima importancia entre las moléculas constituyentes de los seres vivos (biomoléculas). Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de lapresencia o la actividad de este tipo de moléculas (Berg et al, 2008).
Determinar la concentración de proteínas en una muestra biológica es una técnica de rutina básica cuando se aborda un esquema depurificación de una proteína concreta, cuando se quiere conocer la actividad específica de una preparación enzimática, para el diagnóstico de enfermedades, así como para muchos otros propósitos.Existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas. Muchos de estos métodos se basan en: a) la propiedad intrínseca de las proteínas para absorber luz en el UV, b) para la formación de derivadosquímicos, o c) la capacidad que tienen las proteínas de unir ciertos colorantes (Segal, 2005).















MARCO TEORICO
Curva de calibración: método de química analíticaempleado para medir la concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una serie de elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en principio lineal entreun carácter medible (por ejemplo la absorbancia en los enfoques de espectrofotometría) y la variable a determinar (la concentración).
Reaccion de Biuret: La producen los péptidos y las proteínas, perono los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, seforma una sustancia compleja denominada Biuret. Debido a dicha reacción fue que se observa que al agregar el reactivo de sulfato de cobre mas solución de proteína precipita una coloración violeta.Quedando en el fondo del tubo una tonalidad azul cielo reacción positiva. (http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf)
Reactivo de Bradford: Se emplea un colorante hidrofóbico cuyas...