determinacion de proteinas

Determinación de proteínas por el método Kjeldhal.
Materiales y métodos.
Matraces Erlenmeyer de 500 ml.


Vasos de precipitado de 100 ml.
Bureta de 250 ml.
Soporte universal.
Probeta de 100,250 y 500 ml.
Matraces Kjeldhal.
Perlas de ebullición.
Pinzas de tres dedos.
Balanza analítica.
Aparato Kjeldhal.
Reactivos.
Agua destilada.
H2 SO4 Ácido sulfúrico concentrado.
HCL Ácidoclorhídrico 0.1N (Para titulación).
H3BO4 Ácido bórico al 4%.
Mezcla de catalizadores: Mezclar de 2.5 al 4g de sulfato de sodio o potasio y de 0.1 a 0.3g de sulfato de cobre. Homogeneizarperfectamente.
Indicador de Wesselow: Mezclar una parte de rojo de metilo al 0.2% en etanol con una parte de azul de metileno al 0.1% en agua.
NaOH Hidróxido de sodio al 40%.

Función de los reactivos.Ácido sulfúrico = Hidroliza enlaces peptídicos y quema la materia orgánica.
Solución de hidróxido de sodio al 40% = Sirve para neutralizar la reacción.


Procedimiento.

1. Pesar exactamente de 0.5 a1g de muestra (seca o humedad), de acuerdo con su contenido de nitrógeno, sobre papel libre de nitrógeno, tarado previamente.
2. Colocar la muestra en el fondo del matraz kjeldhal y adicionaraproximadamente 2g de la mezcla de catalizadores y de 10 a 15 ml de acido sulfúrico concentrado y 5 perlas de ebullición en cada matraz.
3. Colocar en el matraz digestor, calentar suavemente al principio ydespués en forma enérgica. Calentar hasta su completa oxidación, punto donde la mezcla forma una solución verde clara trasparente, algunas veces se presenta un precipitado gris correspondiente a loscatalizadores. Si se agota el ácido y no se ha digerido completamente la muestra, ( esto es cuando no se ha alcanzado el color verde claro transparente), dejar enfriar, añadir otra pequeña cantidadconocida de ácido y continuar calentando.
4. Terminada la digestión enfriar el matraz enfriar el matraz en una campana para extracción de gases (o en su defecto al aire libre), añadir aprox. 200 ml....