determinación de glucidos
Páginas: 2 (456 palabras)
Publicado: 17 de enero de 2015
Determinación de Glúcidos
I) Métodos basados en el poder reductor:
Método de Fehling-Causse-Bonnans
Valoración del reactivo: En un erlenmeyer de 250 ml de capacidad se colocanexactamente 10 ml de reactivo FCB, 30 ml de agua destilada y 2 o 3 trozos de porcelana porosa y se calienta a ebullición. Una vez alcanzada ésta, se comienza a agregar desde la bureta especial la soluciónpatrón de azúcar a una velocidad de goteo controlada (medirla) evitando interrumpir la ebullición. Cuando la coloración azul del reactivo disminuye de intensidad o alcanza un tono celeste verdoso, seagregan 3 gotas de la solución acuosa de azul de metileno y se continúa con el agregado de solución patrón, gota a gota, hasta decoloración. La primera gota que torna a amarillo oro parte de la soluciónindica el punto final. Se debe realizar esta valoración por duplicado.
Método microcolorimétrico de Nelson-Somogyi
Se utiliza para la determinación de azúcares reductores.
Determinación: Sedebe hacer un blanco y una curva de calibración con cada serie de muestras. La reacción se lleva a cabo en tubos de ensayo (16 mm x 150 mm) con tapones de vidrio o bolitas de vidrio. Colocar en sendostubos 2 ml de reactivo de cobre y 2 ml de solución a ensayar. Poner los tubos en un baño de agua hirviendo durante 10 min. Enfriar 5 min. en agua corriente. Agregar 1 ml de reactivo arsenomolibdato,mezclar y llevar a un volumen definido entre 10 y 25 ml, dependiendo de la intensidad del color. Medir absorbancia a 500 o 520 nm.
Nota: El color es muy estable
II) Métodos colorimétricos queinvolucran reacciones de condensación:
Método de la Antrona/sulfúrico
La mayoría de los carbohidratos dan la reacción de la antrona/sulfúrico en alguna medida pero en las condiciones descriptas lareacción es razonablemente específica para hexosas. Todos los polisacáridos reaccionan en medio ácido fuerte dando un cromógeno (furfural y derivados) que condensan con n cromóforo (reactivo) para...
I) Métodos basados en el poder reductor:
Método de Fehling-Causse-Bonnans
Valoración del reactivo: En un erlenmeyer de 250 ml de capacidad se colocanexactamente 10 ml de reactivo FCB, 30 ml de agua destilada y 2 o 3 trozos de porcelana porosa y se calienta a ebullición. Una vez alcanzada ésta, se comienza a agregar desde la bureta especial la soluciónpatrón de azúcar a una velocidad de goteo controlada (medirla) evitando interrumpir la ebullición. Cuando la coloración azul del reactivo disminuye de intensidad o alcanza un tono celeste verdoso, seagregan 3 gotas de la solución acuosa de azul de metileno y se continúa con el agregado de solución patrón, gota a gota, hasta decoloración. La primera gota que torna a amarillo oro parte de la soluciónindica el punto final. Se debe realizar esta valoración por duplicado.
Método microcolorimétrico de Nelson-Somogyi
Se utiliza para la determinación de azúcares reductores.
Determinación: Sedebe hacer un blanco y una curva de calibración con cada serie de muestras. La reacción se lleva a cabo en tubos de ensayo (16 mm x 150 mm) con tapones de vidrio o bolitas de vidrio. Colocar en sendostubos 2 ml de reactivo de cobre y 2 ml de solución a ensayar. Poner los tubos en un baño de agua hirviendo durante 10 min. Enfriar 5 min. en agua corriente. Agregar 1 ml de reactivo arsenomolibdato,mezclar y llevar a un volumen definido entre 10 y 25 ml, dependiendo de la intensidad del color. Medir absorbancia a 500 o 520 nm.
Nota: El color es muy estable
II) Métodos colorimétricos queinvolucran reacciones de condensación:
Método de la Antrona/sulfúrico
La mayoría de los carbohidratos dan la reacción de la antrona/sulfúrico en alguna medida pero en las condiciones descriptas lareacción es razonablemente específica para hexosas. Todos los polisacáridos reaccionan en medio ácido fuerte dando un cromógeno (furfural y derivados) que condensan con n cromóforo (reactivo) para...
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