determinación de e.coli y coliformes fecales

PRACTICA N°8: DETERMINACIÓN DE E. COLI Y PRUEBAS BIOQUIMICAS DE IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS.

1. OBJETIVOS:

Comprender las pruebas para determinar
Aplicar la metodología o procedimientoadecuado.
Entender los principios bioquímicos de las pruebas.
Ser capaces de interpretar adecuadamente los resultados entregados por las pruebas bioquímicas.
2. MARCO TEÓRICO

MOTILIDAD
FUNDAMENTO:Queremos investigar si un microorganismo es móvil o no. Para ello se emplea un medio semisólido (con Agar al 0'2%), en el que la bacteria móvil difunda lo más rápidamente posible.
TECNICA: Lainoculación se debe hacer por picadura en el centro del medio de cultivo con el asa de picadura hasta una profundidad de 1,2 a 1,5 cm. Incubación a 22°C a 37ºC - 24 h.
RESULTADO +: Aparece una turbidezque se difunde por todo el tubo.
RESULTADO -: Se produce una línea de crecimiento limitada a seguir la línea de siembra, mientras que el medio que la rodea se mantiene claro.

ROJO DE METILOFUNDAMENTO: se trata de una prueba para detectar la producción de ácidos fuertes (lácticos, fórmicos y acéticos) a partir de la fermentación “ácido-mixta” de la glucosa. Se consideran rojo de metilopositivo sólo aquellos microorganismos que puedan mantener un PH ácido bajo, tras una incubación prolongada (24-48h) contrarrestando el sistema estabilizador de PH del medio. Se basa simplemente en elempleo de un indicador de PH (rojo de metilo) para determinar la concentración de iones hidrógeno (PH) presentes cuando un organismo degrada la glucosa.
TECNICA: Tras la inoculación en caldoglucosafosfato, se incuba a 37°C - 24 h.
Después de la incubación, para llevar a cabo la interpretación, se añade el reactivo Rojo de metilo: unas 5 gotas. El resultado se interpreta inmediatamente: con un pHinferior a 4'4 el reactivo permanece rojo, y con un pH superior a 6 vira a color amarillo. Con un pH entre 5 y 5'8 se producen diferentes tonalidades de anaranjado.
RESULTADO +: color rojo del...