DISEÑO DE UNA LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS IN VITRO

ESCUELA POLITÉCNICA DEL EJÉRCITO
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA
CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

Fecha: 2012-04-17

DISEÑO DE UNA LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS IN VITRO
INTRODUCCIÓN:
El cultivo de tejidos es un grupo técnicas basadas en aislar una porción de planta (explante) y proporcionarle condiciones artificiales físicas y químicasadecuadas para que las células expresen su potencial intrínseco o inducido. El laboratorio de cultivo de tejidos comprende un grupo heterogéneo de técnicas en donde un explante (protoplasto, célula, tejido u órgano vegetal) se cultiva en condiciones asépticas en un medio de cultivo de composición química definida y posteriormente de lo incuba en condiciones ambientales controladas. (Roca & Mroginski,1993)
Los objetivos de la plantación de un laboratorio de cultivo de tejidos son numerosos y variables, entre ellas tenemos: incremento de la variabilidad genética, conservación e intercambio de germoplasma, conservar especies en vía de extinción, crear una gran número de plantas en poco tiempo para el comercio, obtención de plantas libres de patógenos, estudios de fisiología, genética,bioquímica, entre otras.
Las técnicas de cultivo de tejidos dependen del tipo de explante y del objetivo propuesto debido a que a que cada técnica es específica, por ejemplo la técnica empleada para cultivo de meristemas difiere de la técnica de protoplasto y elementalmente depende del objetivo propuesto.
El diseño de un laboratorio de cultivo de tejidos depende de los objetivos, un laboratorio deinvestigación tiende a ser de tamaño menor que uno de producción comercial, el de investigación tiene áreas y equipos de enseñanza y demostración, en cambio el de producción será más simple pero más grande con áreas mayores de incubación e invernadero para el gran número de plantas a producirse. Cada uno de ellos deberá tener áreas de establecimiento, crecimiento y multiplicación de plantas producidas,sin embargo el laboratorio de producción comercial tendrá áreas adicionales de cuarentena y evaluación fitosanitaria. (Roca & Mroginski, 1993)
Para el correcto desarrollo de los tejidos se requiere algunas condiciones donde no deben suponer un riesgo para este tipo de cultivos donde debe evitarse (Morgan, 1994):
Humedad y temperaturas extremas.
Olores desagradables.
Corrientesde aire molestas.
Cambios bruscos de temperatura.


Para el establecimiento de un laboratorio de cultivo de tejidos los principales aspectos que se deben determinar son (Díaz, 2007):
1. Tipo de explante. El explante es cualquier porción de tejido vegetal que sea capaz de responder, depende de la edad, del grado de diferenciación, en donde, un explante más joven y menos diferenciado tendrá una respuesta mejorque uno viejo y mas diferenciado.
2. Medio de Cultivo. El medio de cultivo está conformado básicamente por: nutrientes minerales, una fuente de carbono y vitaminas, adicionalmente puede tener: agente gelificante, agua de coco, extracto de lavadura, extracto de frutos de tomate y extracto de tubérculos de papa.
3. Reguladores de crecimiento. También llamadas fitohormonas, comprende principalmenteauxinas, citocininas, giberelinas, etileno, ácido abcísico. Todas ellas se relacionan con procesos de crecimiento celular y división celular.
4. Condiciones ambientales: Las condiciones más importantes son fotoperiodo, tipo e intensidad de la luz, temperatura y humedad.
ORGANIZACIÓN DEL LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS
Las áreas del laboratorio se dividen de acuerdo a la función que serealice, alguna de ellas son áreas sucias, otras son áreas semi-limpias y otras son áreas limpias. Algunas áreas pueden están incluidas dentro de alguna área.

Figura1. Organización de un laboratorio de cultivo de tejidos in vitro comercial.
Las principales áreas son:
ÁREAS NO ESTÉRILES
Oficina: Es el sitio de trabajo para personal administrativo de académico. En esta área se debe incluir...