DNA plasmidico
Introducción
El DNA es uno de los dos tipos de ácidos nucléicos que existen; en los seres vivos, es conocida como la molécula de la herencia en todas las formas de vida, así como en algunosseres virus. El termino DNA recombinante significa la unión o recombinación de dos piezas de DNA de dos diferentes especies. Esta técnica permite modifican un gen de una especie para insertarlo al DNA deotras especies, donde se replica junto con el DNA del hospedero.
Muchas bacterias contienen también otras moléculas de DNA circular pequeño denominadas plásmidos, que se encuentran separadas delcromosoma de la célula.
Aunque no son necesarias para la división celular, los plásmidos normalmente proporcionan a la célula alguna ventaja metabólica sobre las otras células que carecen de ellos. Porejemplo se encuentran en los plásmidos segmentos de DNA que codifican la resistencia a antibióticos y otras sustancias tóxicas como metales. Estas células continúan creciendo y reproduciéndosemientras que las células susceptibles mueren. En la biotecnología, los plásmidos se utilizan como vectores para la clonación de fragmentos de DNA de interés y como sistemas de expresión de genes pos los quesu aislamiento y caracterización es una de las técnicas importantes en esta rama de la ciencia.
Objetivos
-Aislar DNA plasmídico bacteriano, comprobando dicho aislamiento mediante electroforesis engel de agarosa.
- Aislar en DNA plasmídico por método MINI-PREP
Discusión: Con el fin de aislar en DNA plasmídico utilizamos el método MINI-PREP en el cual fue necesario utilizar soluciones yreactivos:
Solución GTE; que es el regulador amortiguador del DNA, en EDTA es la solución quelante, es decir que secuestra los iones y evita así la actividad de las DNAsas, esta se encuentra de maneraisotónica (de la misma concentración de la bacteria).
SDS 1%NaOH 0.2N que rompe la célula para poder extraer el plásmido, la disuelve para liberar el contenido. Para este paso controlamos la degradación...
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