Elaboracion de sensidiscos
Para la elaboración de sensidiscos, los discos de papel filtro No. 4 se hicieron con una perforadora (diámetro de 5 mm), se esterilizaron y se impregnaron con losextractos correspondientes, que previamente obtenidos y almacenados (ultracongelador) se prepararon de la siguiente manera:
a) Extracto acuoso: se utilizó directamente después de filtrar, tomándose 10μl/disco.
b) Extracto etanólico: el contenido de algunos tubos eppendorff (árnica, gordolobo, pasiflora, romero y ruda, respectivamente) se redisolvió cada uno en 900μL de etanol (dilución 1:10); elcontenido de otros tubos (árnica, gordolobo, pasiflora y ruda) se redisolvió en 900μL de agua estéril (dilución 1:10), con el extracto de romero no se logró la suspensión deseada. Obteniéndose discos deextracto etánolico en etanol (10μL/disco) y discos de extracto etanólico en agua (10μL/disco).
c) Extracto hexánico: el contenido de algunos tubos eppendorff (árnica, gordolobo, pasiflora, romero yruda, respectivamente) se redisolvieron en 900μL de hexano (dilución 1:10), se tomaron 10μL/disco.
Además se prepararon los siguientes discos:
d) Discos control. Se impregnaron discos conteniendocada uno:
* 10 μL de Solución salina
* 10 μL de etanol (filtrado en acrodisco de 45 μm de diámetro de poro).
* 10 μL de hexano (filtrado en acrodisco de 45 μm de diámetro de poro).
* 10μL de la mezcla de todos los solventes (sol. salina + etanol + hexano).
e) Mezcla de extractos en diferentes solventes: Se preparó una mezcla tomando 25μL de extracto acuoso + 25μL de extractoetanólico en etanol + 25μL de extracto etanólico en agua + 25μL de extracto hexánico, todos del a misma planta. Se tomaron 10 μL/disco.
f) Mezcla de extractos etanólicos entre plantas. Se prepararonmezclas en relación 50%-50%. 20%-80% y 80%-20% de las diluciones de los extractos etanólicos:
Árnica- Gordolobo Árnica- Romero Árnica-Ruda
Gordolobo-Romero Gordolobo-Ruda Romero-Ruda
Se...
Regístrate para leer el documento completo.