Electroforesis

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Introducción a los métodos espectroscópicos.
UV-Visible Métodos espectroscópicos Plasma Fluorescencia molecular Absorción atómica Refractometría Infrarrojo Raman RMN Rayos-x

UMSNH/FQFB/Agosto 2010

Espectrofotometría Absorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

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Espectrofotometría Absorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

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EspectrofotometríaAbsorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

Espectrofotometría de absorción.
La espectrofotometría de absorción es un método de análisis cuantitativo y cualitativo que se basa en medir la cantidad de luz absorbida por una sustancia (muestra).

???

Cuando le aplicamos luz visible a una sustancia, si no absorbe ninguna λ, la veremos transparente e incolora. Cuando la absorción ocurre a longitudes deonda que el ojo humano no percibe la veremos incolora. Cuando se absorbe toda la luz se verá negra y si absorbe selectivamente una sola longitud de onda la veremos coloreada.

La cantidad de luz absorbida a una longitud de onda en particular dependerá del tipo de sustancia y de la cantidad de átomos o moléculas presentes en el trayecto del haz de luz.
UMSNH/FQFB/Agosto 2010 EspectrofotometríaAbsorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

En este método se hace pasar a través de la muestra un haz de longitud de onda definida (Se usan filtros y luz visible), se mide la absorción mediante un instrumento llamado fotocolorímetro o un espectrofotómetro en donde la longitud de onda se obtiene usando rejillas de difracción o un prisma, se puede usar luz UV o Infrarroja. El instrumento se calibrapreviamente para que de una lectura de cero de A usando el solvente puro y 100% de T bloqueando el paso de la luz. Cuando la sustancia que se quiere analizar no absorbe luz se hace una reacción química para formar un producto que si absorba.

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Espectrofotometría Absorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

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Espectrofotometría Absorción-UV-Vis / Anál Inst / JLSH

Análisis cualitativo: Se requiere de un espectrofotómetro. Se mide la cantidad de luz absorbida por la muestra en un intervalo apropiadode λ; la gráfica resultante (A vs λ) se llama espectro de absorción y es característico para cada sustancia. La muestra se identifica por comparación del espectro de absorción contra el de una serie de substancias puras o interpretándolo. La interpretación consiste en asignar una a cada banda de absorción el grupo funcional que la produjo (grupo cromóforo) en función de su posición, forma eintensidad. Para las sustancias orgánicas éste método tiene una utilidad muy limitada cuando se usa luz visible o ultravioleta; (es mucho más selectivo cuando se usa luz infrarroja).

Absorción ó emisión.

λ
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Análisis cuantitativo: Se mide la cantidad de luz absorbida por la muestra a una λ específica. Esta esdirectamente proporcional a la concentración de la sustancia, la cual podemos obtener por comparación con la absorción de uno o varios estándares. La λ a la que se realizan las mediciones generalmente es aquella donde la sustancia presenta su máxima absorción (λmax, la cual se obtiene de su λ espectro) y en los métodos analíticos de rutina queda en la región visible o UV.

Emisión.

Si se mide laemisión, la relación es lineal.

C
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% Luz Transmitida.

Si se mide la transmisión la relación es logarítmica.

C
Las cantidades para medir la absorción se llama absorbancia y son función logarítmica del porcentaje de luz transmitida.

A.

C
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